[发明专利]一株可降解PVA的假单胞菌菌株

说明书

技术领域：

本发明涉及到一株降解PVA1799的假单胞菌菌株及其应用，尤其涉及一种能独立降解环境中PVA1799的假单胞菌属菌株，属于生物工程技术领域。

背景技术：

聚乙烯醇(PVA)在纺织工业中被广泛用作上浆剂，其中PVA1799更是占有相当大的比例。经PVA上浆的棉织物必须经过退浆处理，以增加棉织物对水的吸收性。目前常用的退浆方法是使用热水在棉织物表面洗脱PVA，有时使用氧化剂如NaBrO₂等，这就导致纺织厂排出的废水中含有大量的PVA和氧化剂，这些会对环境造成极大的污染。

如果能将PVA降解酶或PVA降解菌运用于纺织工业的退浆工艺，在退浆工段就实现对PVA的生物降解，不仅能大大减少PVA废水的排放，还能避免化学退浆过程中高温和氧化造成的棉纤维损伤。研究和筛选PVA降解微生物及PVA降解酶将有助于其在退浆工艺上的运用，对于减轻环境污染将具有重大的意义。

本发明所报道的假单胞菌菌株属能单独降解的培养基中的PVA1799，纯菌的获得对PVA降解酶尤其是PVA氧化酶的研究有很大帮助。

发明内容：

本发明要解决的技术问题是提供了一种独立降解溶液中PVA1799的菌株TD5，命名为假单胞菌Pseudomonassp.TD5，于2013年10月13日保藏于中国典型微生物保藏中心，保藏编号为CCTCCNO：M2013468，保藏地址为：中国武汉、武汉大学。

所述假单胞菌能够降解溶解态的PVA1799。

用于培养权利要求1所述假单胞菌的最佳培养基：(g/L)：PVA17991，酵母粉1，蛋白胨1，KH₂PO₄1.6,K₂HPO₄0.02,NH₄SO₄0.5,FeSO₄﹒7H₂O0.02,CaCl₂﹒2H₂O0.064,MgSO₄﹒7H₂O0.1,NaCl0.02,pH7.5。发酵培养基为(g/L):PVA17991，酵母粉0.01,KH₂PO₄1.6,K₂HPO₄0.02,NH₄SO₄0.5,FeSO₄﹒7H₂O0.02,CaCl₂﹒2H₂O0.064,MgSO₄﹒7H₂O0.1,NaCl0.02,pH7.5。

所述培养基的最佳培养温度为30℃，最适pH为7.5。

本发明还提供了一种应用所述假单胞菌降解培养基中PVA1799的方法，将所述假单胞菌种子接种入发酵培养基。

优选方案为：将种子液3OD离心后，重悬接种入发酵培养基中，30℃培养条件下，7天内培养基中的PVA1799能够被完全降解。

附图说明：

图1为筛选纯化所得TD5在PVA1799唯一碳源的琼脂平板上的菌落形态及Finley法显色后的透明圈图

图2为将TD5接种入发酵培养基后摇瓶降解特性图

图3为TD5的系统发育树图

具体实施方式;

实施例1特异性降解PVA菌株的定性筛选

1、菌株来源：活性污泥

2、培养方法：将采样所得活性污泥10g，加入90mL无菌生理盐水，摇床（200rpm）震荡6h。

3、筛选：将菌悬液稀释不同倍数后涂布PVA唯一碳源平板上，30℃培养，Finley法显色后，选取可以产生透明圈的菌株反复进行3次平板纯化，最终获得纯目的菌株，于2013年10月13日保藏于中国典型微生物保藏中心，保藏编号为CCTCCNO：M2013468，保藏地址为：中国武汉、武汉大学。

实施例2PVA降解酶酶活的测定

1、Finley法（改良）：取400μL发酵液上清，加入标准10mL比色管中，加入3mL25g/L的硼酸溶液，加入300μL0.1mol/L的I2-KI，补充水至10mL。避光反应5min，于波长690nm下测定吸光值。