[发明专利]一种麻疯树再生苗增根的方法

说明书

技术领域

本发明属于植物无性繁殖技术领域，具体涉及一种麻疯树再生苗增根的方法。

背景技术

麻疯树（Jatropha curcas L.）是大戟科麻疯树属植物，为落叶灌木或小乔木，其种仁的含油量可高达40%～60%，可用于柴油发动机，麻疯树是发展生物柴油最具潜力的能源植物之一。麻疯树中含有抗病毒、抗肿瘤等活性成分，目前已有关于麻疯树中抗病毒及抗肿瘤活性成分的毒理试验研究以及动物模型的初期研究。此外，麻疯树在农药、蚕制品及日化品等领域也具有实际应用价值。但麻疯树分布局限、产量较低且不稳定、良种不足，这些因素严重地限制了麻疯树资源的大规模开发。

高效的植株再生体系能为基因转化提供良好的平台，因此以组织培养为基础，通过基因工程方法可以获得改良的麻疯树品种，改良的麻疯树品种通过组织培养能进行快速繁殖，从而能够促进麻疯树的产业化发展。目前可利用麻疯树的叶片、子叶、上胚轴、下胚轴和腋芽为外植体获得麻疯树再生苗，但麻疯树再生苗在生根阶段存在生根数量少以及生根弱小等问题，导致麻疯树的移栽成活率低，移栽后生长缓慢、长势差，很难得到具有实际应用价值的麻疯树植株。此外，利用培养基对麻疯树进行生根培养时再生根是生长在琼脂中的，由于琼脂极易染菌，导致移栽后再生苗的根部极易腐烂甚至死亡，因此在移栽再生苗前必须将残留在根上的琼脂清洗干净，但清洗附着在根上的琼脂容易对再生苗的根系造成伤害，同样会影响再生苗的移栽成活率以及移栽后再生苗的长势。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种麻疯树再生苗增根的方法，该方法不仅稳定高效、成本低廉，且可大大提高再生苗的移栽成活率以及移栽后再生苗的长势。

本发明提供的麻疯树再生苗增根的方法，该方法的增根步骤及条件如下：

（1）在组培容器底部先铺一层灭菌基质材料，然后加入增根培养基，再对其进行灭菌并干燥至增根培养基表面没有水珠；

（2）将麻疯树再生苗接种到上述增根培养基中，使再生苗的根部位于增根培养基和基质材料相接部位，且不接触组培容器，然后于光照强度1500～2000Lx、光照时间12～16h/d下培养至麻疯树根系贴组培容器底部蔓延时即完成麻疯树再生苗的增根；

所述增根培养基是在每升MS培养基中添加吲哚丁酸0.01～0.05mg、蔗糖2.0～20.0g、琼脂5.0～7.0g组成；所述基质材料为蛭石、营养土、河沙或者草炭中的至少一种。

上述方法中，所述基质材料的添加量为增根培养基体积的10～30%，优选10～25%。

上述方法中，所述蛭石、营养土以及河沙的粒径≤375微米。

上述方法中，所述增根培养基的组成优选为在每升MS培养基中添加吲哚丁酸0.01～0.025mg、蔗糖2.0～10.0g、琼脂5.6～7.0g。

上述方法中，所述增根培养基的pH值为5.8～6.0。

上述方法中，步骤（2）中的培养温度为24～26℃，相对湿度为60～90%。

上述方法中，所述麻疯树再生苗可通过宗桦等报道的方法（宗桦,王胜华.等,麻疯树叶片高效再生体系与不定芽起源,应用与环境生物学报[J],2010,16(6):789～793.）获得，也可通过中国专利CN101574058B公开的方法获得，但是麻疯树再生苗的获得不局限于上述方法。

本发明具有以下有益效果：

1、由于本发明提供的方法在增根培养基的底部添加了一层基质材料，因而不仅可增加麻疯树再生苗根部生长环境的透气和疏松性，有助于根的生长，且基质材料还能促进根吸收的营养量，保证麻疯树再生苗的长势良好。

2、由于本发明提供的方法在接种麻疯树再生苗时，再生苗的根部是位于培养基和基质相接部位中，因而既使再生苗的基部能方便的吸收增根培养基提供的必要营养元素和糖类物质，又能使增根时麻疯树的根系能顺利的生长在基质材料中，避免增长的根系与培养基中琼脂直接接触，省去了移栽增根再生苗时清洗附着在根系上琼脂的工序，也避免了清洗琼脂对根系造成伤害，大大提高了移栽成活率及移栽后再生苗的长势。

3、由于本发明提供的方法在增根培养基进行灭菌后对其表面多余的水分进行了干燥操作，因而既能使其中的水分含量满足麻疯树再生苗增根过程中对水分的需求，又能避免增根培养基水分含量过高而出现根腐烂的情况。