[发明专利]一种萘检测生物细胞传感器及其制备方法和使用方法

权利要求书

1.一种萘检测生物细胞传感器，其特征在于：

所述萘检测生物细胞传感器为基因重组细胞，所述基因重组细胞以水杨酸检测光传感细胞为宿主细胞，并且所述基因重组细胞的质粒由萘降解基因与载体质粒重组。

2.根据权利要求1所述的萘检测生物细胞传感器，其特征在于：

所述萘降解基因与所述载体质粒通过Gibson一步恒温法实现DNA重组（One-step isothermal DNA assembly）得到所述基因重组细胞的质粒。

3.根据权利要求1所述的萘检测生物细胞传感器，其特征在于：

所述萘降解基因为NahAD；

所述载体质粒为pWH1274；

所述水杨酸检测光传感细胞为不动杆菌ADPWH_lux（Acinetobacter ADPWH_lux）。

4.一种如权利要求1～3所述的萘检测生物细胞传感器的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1）宿主细胞水杨酸检测光传感细胞的培养；

2）获取载体质粒和萘降解基因；

3）通过Gibson一步恒温法将载体质粒和萘降解基因重组得到所述基因重组细胞的质粒；

4）将步骤3）得到的所述基因重组细胞的质粒转入步骤1）得到的宿主细胞水杨酸检测光传感细胞。

5.根据权利要求4所述的萘检测生物细胞传感器的制备方法，其特征在于：

所述步骤2）包括以下步骤：

2-1）载体质粒的选择与处理

其中，载体质粒的选择是选择带有强启动子质粒载体的菌株；

其中，对载体质粒进行处理，包括以下步骤：

2-1-1）提取载体质粒、2-1-2）对载体质粒DNA进行检测、2-1-3）载体质粒聚合酶链式反应，即PCR（Polymerase Chain Reaction）、2-1-4）载体质粒的PCR产物的纯化、2-1-5）PCR产物的检测；

2-2）萘的降解基因的选择和处理，包括以下步骤：

其中，对萘的降解基因的选择是分析降解菌对PAHs污染物的降解机理，选择能够降解萘的菌株；

2-2-1）提取含萘的降解基因的质粒、2-2-2）萘降解基因的质粒DNA的检测、2-2-3）所述含萘降解基因质粒的PCR反应、2-2-4）PCR产物的纯化、2-2-5）PCR产物的检测。