[发明专利]一种布雷菲德菌素A糖基化衍生物及其制备与应用

说明书

（一）技术领域

本发明涉及一种布雷菲德菌素A衍生物合成技术，特别涉及一类布雷菲德菌素A糖基化衍生物制备及其应用。

（二）背景技术

布雷菲德菌素A((+)-Brefeldin A，BFA)，是一种丝状真菌合成的大环内酯类抗生素，也称之为斜卧菌素、壳二孢素。布雷菲德菌素A分子结构中含有5个手性中心和1个13元大环内酯结构，结构如式(I)所示。1958年，Singleton等人从Penicillium decumben发酵液中首次分离得到布雷菲德菌素A。大量研究报道，布雷菲德菌素A诱导高尔基体分解，抑制蛋白质由内质网向高尔基体的顺向转运过程，具有抗真菌、抗病毒、抗有丝分裂和抗线虫等生物学活性。美国肿瘤研究院(NCI)研究发现，布雷菲德菌素A能够诱导肿瘤细胞分化和凋亡，在小鼠肿瘤模型上表现出明确的抗肿瘤活性。布雷菲德菌素A作为化疗试剂母核用于癌症治疗药物具有广阔的应用前景。

然而，就成药性而言，布雷菲德菌素A尚存在一些不足：①布雷菲德菌素A水溶性低；②布雷菲德菌素A胞内半衰期短，Bruening等发现布雷菲德菌素A在细胞内会在谷胱甘肽转硫酶的作用下，迅速与谷胱甘肽结合并随后被转移出细胞；③布雷菲德菌素A缺乏作用靶标专一性，对正常体细胞有毒副作用。为了克服这些缺陷，对布雷菲德菌素A进行结构修饰提高其成药性日益受到重视。

糖缀合物(Glycoconjugate)是一类糖与非糖类化合物，即甙元(Aglycon)如蛋白质、抗体、多肽、脂、核酸等生物分子以及其它小分子，以共价键相互连结而成的化合物。蛋白质翻译后糖基化是人们所熟知的糖基化过程，糖基化作用增加了蛋白质的结构复杂性和相应的功能。通常，糖苷以O-糖苷键、N-糖苷键与甙元共价连接，有些情况下通过C-糖苷键或S-糖苷键等与甙元连接。天然的糖缀合物可在不同的位置上结合1分子或1分子以上的糖基，糖链的长度也从单糖至六糖、七糖不等，甚至17糖。红霉素A肟(erythromycin A)分子含有两分子、活性必需的脱氧己糖结构，缺少任何一种糖将导致效价丧失；脱氧氨基糖存在其它的大环内酯抗生素如竹桃霉素(oleandomycin)和巨大霉素(megalomicin)结构中。天然糖基化抗生素的生物合成途径启发我们选择性糖基化修饰布雷菲德菌素A，在保留布雷菲德菌素A抗癌活性的基础上改善药物的物理化性质、提高其胞内稳定性和作用靶标专一性，降低其毒副作用。

目前鲜有布雷菲德菌素A糖基化方法的报道。本专利发明一种布雷菲德菌素A糖基化修饰方法，以及一类具有抗肿瘤活性的布雷菲德菌素A糖基化衍生物合成工艺。

（三）发明内容

本发明目的是通过三氯乙酰亚胺酯糖基化方法对布雷菲德菌素A的C₇位羟基进行糖基化修饰，获得5个新的布雷菲德菌素A糖基化衍生物，并评价糖基化修饰后布雷菲德菌素A的抗肿瘤活性。本发明的目的在于提供一类具有明显抗肿瘤活性的布雷菲德菌素A糖基化衍生物，对人食管癌细胞有效抑制达80%以上，以及一种简单的布雷菲德菌素A糖基化衍生物的制备方法。

本发明采用的技术方案是：

本发明提供一种式（Ⅰ）所示布雷菲德菌素A糖基化衍生物，

式（Ⅰ）中，R为五碳糖、六碳糖、氨基六碳糖及六碳糖酸等（R还可以是其他六碳糖衍生物或五碳糖衍生物），优选所述R基团为D-α-葡萄糖、D-α-氨基葡萄糖、D-α-阿拉伯糖、D-α-葡萄糖酸或D-α-甘露糖，更优选所述R为D-α-葡萄糖。