[发明专利]生防菌株BS71及其在防治农作物黄曲霉毒素污染中的应用

说明书

技术领域

本发明属于作物病害防控技术领域，尤其涉及一种生防菌株BS71及其在防治农作物黄曲霉毒素污染中的应用。

背景技术

黄曲霉毒素（Aflatoxin，以下简写成AFT）主要是黄曲霉(Aspergillus flavus)和寄生曲霉(A.parasiticus)的代谢产物，是迄今发现的污染农产品毒性最强的一类生物毒素。据世界粮农组织估计，目前世界范围内有25％的农作物产品受真菌毒素的污染，其中主要就是AFT。在我国花生、玉米等作物的黄曲霉毒素污染严重影响着食品安全和农产品出口竞争力。

由于AFT污染所带来的巨大经济损失和健康危害，人们一直在探索控制AFT污染的有效措施。选育抗病虫品种是控制黄曲霉毒素的重要途径之一，但由于选育抗AFT的作物品种周期长，在生产中广泛应用还尚需时日。目前控制农产品AFT比较有效的是生物防治，美国近来在AFT生物防治研究方面已取得重大进展，即：利用不产AFT的黄曲霉菌株NRRL21882能有效防治花生AFT污染，其防效可达90%以上，使花生中AFT的含量能有效控制在限量标准范围内。我国在AFT生物防治方面研究还刚刚起步。已有研究发现，一株不产黄曲毒素的黄曲霉菌株A051可用来控制农产品黄曲霉毒素的污染（ZL200810120929.2），由乳酪杆菌、枯草芽孢杆菌和异常汉逊酵母复合培养液在抑制黄曲霉生长和降解毒素方面有一定作用（CN201110190287.5）。公开号为CN102816725A的中国专利文献还公开了一种枯草芽孢杆菌T-500，该菌株虽然对多种病原菌具有拮抗作用，但是对黄曲霉菌的抑制率仅为35.7%，效果较差。我国微生物资源丰富，挖掘其它控制黄曲霉毒素污染的潜在生防菌，对有效控制我国黄曲霉毒素污染意义重大。

发明内容

本发明提供了一种生防菌株BS71，对黄曲霉菌菌丝生长、孢子萌发有较好的抑制作用，对储存过程中农作物黄曲霉毒素污染具有较好的防治效果。

本发明提供了一种生防菌株BS71，分类命名枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis），完整命名为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）BS71，已于2013年9月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为：CGMCC No.8191。

该菌株BS71在LB培养基上菌落表面粗糙、不透明，呈现皱缩、白色，能够形成芽孢，能移动，需氧型。

本发明还提供了所述生防菌株BS71在防治农作物黄曲霉毒素污染中的应用。

实验发现，本发明的生防菌株BS71对黄曲霉菌菌丝生长、孢子萌发有较好的抑制作用，对储存过程中花生、玉米黄曲霉毒素污染具有较好的防治效果，因此，可将该生防菌株BS71用于防治农作物的黄曲霉毒素污染。

所述的农作物具体可以为花生或玉米，其中，所述花生的品种具体可以为鲁花9号。

所述应用具体包括：

（1）制备含所述生防菌株BS71的生防菌剂；

（2）将所述的生防菌剂喷施在所述的植物上。

喷施生防菌剂时，选择农作物易被黄曲霉毒素污染的时期进行喷施,喷施至植物表面水珠流动即可。如对花生黄曲霉毒素污染进行防治时，可在储藏期将所述的生防菌剂喷施在花生果实上，喷施至花生果实表面水珠流动即可，喷施结束后可将花生置于常温储存。

为达到较好的防治效果，所述的生防菌剂中，所述生防菌株BS71的浓度优选为1×10⁸～10¹⁰CFU/mL，更优选为1×10⁸CFU/mL。

所述生防菌剂可通过如下方法进行制备：

（1）将所述生防菌株BS71于培养基中培养至OD₆₀₀为0.5～0.8，获得种子液；

（2）将种子液接种于发酵培养液中扩大培养，调节发酵液中生防菌株BS71的浓度至1×10⁸～10¹⁰CFU/mL，获得所述生防菌剂。

所述的培养基可选用LB液体培养基。

其中，所述种子液的接种量优选为1～2%（v/v），优选为1%（v/v）。