[实用新型]硅珠法提取DNA用的离心管结构

说明书

技术领域

 本实用新型属于核酸DNA或RNA分离纯化用器材技术领域，具体涉及一种硅珠法提取DNA用的离心管结构。

背景技术

分离纯化即提取DNA不论是在医疗、刑事案件侦查和对事故遇难者的识别、考古等领域还是在动植物检验检疫领域均具有积极的意义，DNA的检测方法主要但并不限于有以下几种：酚-氯仿抽提法、chelex-100法；磁珠法；有机溶剂法；盐析法和硅珠法，等等。但是不论采用何种方法，其共同特点或称共同要求大致可归纳为以下两个方面：一是尽可能最大程度地提高DNA或RNA的产量和纯度并且将PCR反应抑制物降低到最小；二是简便高效、成本低并且污染小。

在前述的DNA检测方法中，酚-氯仿抽提法曾是普遍使用的方法，但是由于酚-氯仿抽提法操作繁琐、提取的DNA存在难以避免的蛋白质污染以及由于酚和氯仿具有危害人体的毒性而逐渐被业界冷遇。

由于硅珠法具有高效、成本低和趋于无污染等长处，因而普遍受到业界的认可，该法是先将检材引入离心管中，并且向离心管内加入TES（三羟甲基甲胺基乙磺酸，简称生物缓冲剂）和SLS（十二烷基磺酸钠盐）；再加热裂解并且加入吸附液，而后高速离心约二分钟后采用移液器移管，也就是将离心管内的物料移至另一离心管中并且加入硅珠静置（通常为15min）左右；最后依次用漂洗液漂洗、乙醇漂洗和TC（洗脱液）洗脱。但是，硅珠法提取DNA在实际的操作过程中存在以下缺憾：其一，由于存在使用移液器负压移管环节，因此在移管过程中，先前位于离心管内的液体不能充分转移到另一离心管中，从而致使水溶性的DNA模板损失较大（通常达30%以上）；其二，由于在用移液器移管过程中，原有离心管中的杂质不能充分去除，因而影响PCR扩增（聚合酶链式反应，英文名称为：Polymerase Chain Reaction）；其三，由于存在人工移管环节，因此在一定程度上仍不足以体现省时省力和快捷的效果；其四，由于TES和SLS对吸附液的稀释作用，从而使吸附液的浓度显著下降（约为原来浓度的70%左右），严重影响硅珠吸附DNA的能力；其五，由于受前述DNA模板损失和TES以及SLS对吸附液稀释的双重影响，使DNA模板的浓度显著下降（仅为原有浓度的将近50%左右，甚至低于50%）。

十分明显，并不限于前述例举的硅珠法提取DNA的欠缺可归结于操作过程中的移管所致，更具体地讲，如果在操作过程中摒弃由移液器将先前的离心管内的液体转移至另一离心管，那么上述问题便可迎刃而解。为此，本申请人进行了文献检索，中国专利授权公告号CN201744365U推荐有“滤膜离心管”，该专利方案虽然能体现其说明书第0007栏中所述的技术效果，并且由其0009栏的描述可知，在操作过程中无需移管，但是由于结构有失合理而存在以下弊端：一是杂质易随体液从滤膜（专利称混合纤维微孔滤膜）进入离心管的下部，从而对水溶性的DNA模板的纯度产生影响；二是由于供滤膜搁置的橡胶环难以与离心管的内壁之间形成理想的密封，因此杂质同样会从橡胶环与离心管的内壁之间的微隙中进入离心管的下部，因为该专利教导的橡胶环必需满足与离心管的管腔腔壁可插拔要求，于是，如果为了满足橡胶环与离心管的管腔腔壁之间达到极致的密封效果，那么在后续的操作步骤中难以通过橡胶环上的挂环将橡胶环连同压环以及滤膜取出离心管，反之，如果为了保障方便地取出橡胶环，那么势必影响橡胶环与离心管的管腔腔壁之间的密封效果；三是由于仅凭一枚滤膜而客观上无法体现滤除杂质的良好的效果，从而影响PCR扩增。

授权公告号CN202610231U提供有“多层核酸吸附离心套管”，由于该专利方案对DNA的提取原理与前述专利相反，即采用的是吸附法，虽然在操作过程中无需移管，但是DNA的模板损失难以控制，具体可参见该专利的说明书第0025栏。

鉴于上述已有技术，本申请人作了持久而有益的探索与尝试，终于形成了下面将要介绍的技术方案，并且在本申请人采取了严格的保密措施下经反复的实验证明是切实可行的。

发明内容

本实用新型的任务在于提供一种有助于摒弃二次移管而藉以避免水溶性的DNA模板损失、有利于充分去除杂质而藉以保障PCR的扩增、有益于避免依赖人工移管而藉以体现操作过程中的快捷与省力和有便于防止TES、SLS对吸附液的浓度产生影响而藉以增进硅珠对DNA的吸附能力和有善于充分保留原有DNA模板而藉以显著提高低拷贝生物检材的检出率的硅珠法提取DNA用的离心管结构。