[实用新型]一种同时检测黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A免疫传感器

说明书

技术领域

本实用新型涉及一种同时检测黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A免疫传感器，属于纳米功能材料、免疫技术、生物传感、丝网印刷和食品分析技术领域。

背景技术

黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A均属于真菌毒素。真菌毒素是食品污染中的一类主要污染物，是由产毒真菌在适宜的条件下产生的有毒代谢产物，俗称霉菌毒素。

目前已经发现了300多种，可通过污染谷物及饲料进入食物链，进而污染肉、蛋、奶等动物源性食品，进入人体内，通过对人和动物机体内DNA、RNA、蛋白质和各种酶类的合成抑制以及对细胞结构的破坏而引起真菌毒素中毒，甚至造成致癌、致畸、致突变等严重危害。

较为常见的有：黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、伏马菌素、呕吐毒素、T-2毒素、玉米赤霉烯酮等。

目前，真菌毒素污染物的分析方法主要包括生物鉴定法、化学分析法（如薄层色谱法）、仪器分析法（如高效液相色谱法、气相色谱-质谱联用技术、液相色谱-质谱联用技术）和免疫分析法（如酶联免疫吸附法）等。但是，这些检测方法存在检测物单一、样品前处理复杂、操作繁琐、所需样品用量大、耗时长等缺点，不能很好地满足定量分析的需求。

因此发展快速、简便、灵敏的黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A检测手段显得十分必要。

本实用新型涉及一种同时检测黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A免疫传感器，使用双通道丝网印刷电极制备的双通道免疫传感器可同时检测黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A，与其它检测方法相比，具有灵敏度高，特异性好，成本低廉、快速方便和检测效率高等优势，可实现黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A的同时检测。

实用新型内容

本实用新型的技术方案是：

一种同时检测黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A免疫传感器，其特征在于，在聚对苯二甲酸二乙酯(PET)基底上依次印刷导电银浆制成电极条和电极触点；印刷导电碳油墨制成辅助电极和两个工作电极；印刷银/氯化银混合油墨制成参比电极；印刷绝缘油墨制成敏感池；印刷绝缘油墨覆盖中间导电部分制成绝缘层和在工作电极区域制成一个电解池凹槽，制得双通道丝网印刷电极。

在上述双通道丝网印刷电极中，在其中的一个工作电极表面上，设有羧基化石墨烯层和黄曲霉毒素B1抗体层，在另外一个工作电极表面上设有羧基化石墨烯层和赭曲霉毒素A抗体层，引出线端与电化学工作站连接。

所述羧基化石墨烯层，其作用是用来提高黄曲霉毒素B1抗体和赭曲霉毒素A抗体固载量，增强电子传递能力。

所述电解池凹槽为一矩形凹槽，放置含有铁氰化钾的PBS缓冲溶液。

所述免疫传感器用于黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A同时检测。

本实用新型具备以下优势：

（1）本实用新型采用羧基化石墨烯，可增大工作电极的表面积，提高抗体固载量，增强电子传递的作用，提高了传感器的灵敏度。

（2）本实用新型采用羧基化石墨烯具有良好的生物相容性，增强了传感器的稳定性，使检测结果重现性好。

（3）本实用新型传感器利用抗原抗体的特异反应，特异性好。

（4）本实用新型传感器检测方法简单、快速，易于推广。

（5）本实用新型传感器与现有技术相比，具有制备简单、加工方便、成本低、易于商品化的优点。

（6）本实用新型制备的双通道免疫传感器，可实现对黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A的快速同时测定，显著提高了检测效率。

附图说明

图1为双通道丝网印刷电极六层网版的设计图纸。

图2为双通道丝网印刷电极结构图。

图2标号说明：1、电极条，2、电极触点，3、辅助电极，4、工作电极，5、参比电极，6、敏感池，7、绝缘层，8、电解池凹槽。

具体实施方式

下面结合附图和实施例进一步说明本实用新型。

实施例1  双通道丝网印刷电极的制备

本实用新型结合图1和图2，进行双通道丝网印刷电极的制备，整个印刷电极在厚度为0.5mm、长度为40mm、宽度为20mm的PET板。

制备步骤如下：

（1）在PET基底上印刷导电银浆（ED-479SS，美国埃奇森公司）制成的电极条1和电极触点2，100℃热固化12h。

（2）印刷导电碳油墨（ED-423SS，美国埃奇森公司）制成辅助电极3，100℃热固化12h。

（3）印刷导电碳油墨制成工作电极4，100℃热固化12h。

（4）印刷银/氯化银混合油墨（美国埃奇森公司）制成参比电极5，100℃热固化12h。