[实用新型]细胞缺氧前处理装置

说明书

技术领域

本实用新型涉及一种细胞缺氧前处理装置，属于医疗器械领域。

背景技术

目前细胞水平的缺氧复氧损伤已经成为一个研究热点，在国内外已经大量文献报道细胞缺氧复氧的损伤机制，Webster于1992年研究了心肌细胞缺氧复氧损伤的分子机制，他用N₂饱和的D-Hanks液作为缓冲液，加入细胞后置于无菌密闭容器中，在恒温水浴箱内保持37℃，进气口通人N2，经出气口流出，使容器内保持无氧状态2 h。1998年，Yonemochi，将培养3～4 d的心肌细胞更换经缺氧处理(预先用氩气饱和)、无糖无血清的缓冲液，并在培养孔中灌注高纯度氩气饱和2 h模拟缺氧；2 h后更换含糖和血清的培养基，开放培养板在二氧化碳培养箱中饱和4 h模拟复氧（氩气灌注方法：培养板外周用胶封住，两侧钻小孔。然后从一侧充人氩气120 s，以驱除培养板中的氧气而充满氩气。迅速封闭出入充气口，置于37℃恒温培养箱中）。

实用新型内容

本实用新型所要解决的技术问题在于提供一种简单易操作的细胞缺氧前处理装置。

本实用新型的技术方案是：

一种细胞缺氧前处理装置，包括三通管及其连接的氮气源连接管、培养箱连接管和氮气进气管，所述的氮气进气管连接装有缺氧缓冲液的封闭圆形瓶，并且伸入缺氧缓冲液面下方；所述圆形瓶上还有氮气排气管，在缺氧缓冲液面上与大气联通，所述圆形瓶上还有液体软管，插入到缺氧缓冲液面以下。

使用中，利用三通管的开关位置改变氮气气流方向。

进一步地优选，

所述的氮气源采用浓度为99.999%的高纯氮气。

所述氮气进气管伸入到缺氧缓冲液的管壁上有小孔，孔径为1.0～2.0mm。

所述的氮气源连接管、培养箱连接管、氮气进气管和氮气排气管采用具有较好强度的塑胶管。

所述的氮气源连接管、培养箱连接管、氮气进气管的管径分别为10.0～14.0mm，7.0～9.0mm，3.0～5.0mm。

本实用新型的细胞缺氧前处理装置适用于各种细胞的缺氧前处理技术,是在封闭的装置内，将五根导管与圆形瓶连接起来，并利用三通开关改变氮气气流的方向，形成一个高效的引流系统，使氮气充入降低培养箱的氧浓度和缓冲液中的溶解氧，达到理想的缺氧效果。该装置能够在降低缺氧缓冲液中溶解氧的同时，迅速降低缺氧培养箱中的氧浓度使之达到缺氧状态（小于1% O₂）。

本实用新型装置操作简单，易于推广。其减少了缓冲液的溶解氧浓度，使得缺氧的效果更佳；缩短了加入缓冲液的细胞在非缺氧环境中的时间；减少了科研人员的工作量，无需经常接换高纯氮气导管，只需检查确认三通开关的位置；总体上降低了实验费用，可应用于心肌细胞、肾小管上皮细胞、肝细胞、脑星形胶质细胞等。

附图说明

图1 细胞缺氧前处理装置的结构示意图，

其中1-氮气进气管，2-氮气排气管，3-液体软管，4-氮气源连接管，5-培养箱连接管，6-三通管，7-圆形瓶。

具体实施方式

本实用新型公开了一种细胞缺氧前处理装置，包括三通管6及其连接的氮气源连接管4、培养箱连接管5和氮气进气管1，所述的氮气进气管1连接装有缺氧缓冲液的封闭圆形瓶7，并且伸入缺氧缓冲液面下方；所述圆形瓶7上还有氮气排气管2，在缺血缓冲液面上与大气联通，所述圆形瓶上还有液体软管3，插入到缺氧缓冲液面以下。

实验使用时，将缺氧缓冲液通过圆形瓶液体入口注入圆形瓶内，然后密闭。氮气进气管1和氮气排气管2的末端分别处于缓冲液面下方和上方3～5cm处，起到进气、出气的作用。液体软管3的末端伸入缓冲液面以下4～5cm处。三通管的另两端分别用氮气源连接管连接于高纯氮气，培养箱连接管连接培养箱。

首先，旋转三通管6开关，使得氮气进气管1处于开放状态，然后打开氮气开关，气体沿着导流管壁的方向，会一边流向缺氧培养箱，使里面的氧气压力不断降低，达到理想状态（小于1% O₂）；同时，高纯氮气通过氮气进气管1，吹入密封的含有缺氧缓冲液的圆形瓶7，圆形瓶7中的气体压力会不断增大，并通过氮气排气管2排出。20～25分钟过后，培养箱中的氧气分压已基本降到理想状态（小于1% O₂），且圆形瓶中的缓冲液经过氮气的饱和，溶解氧已基本消失。此时，用一次性注射器经过液体软管3，吸入经过处理的缓冲液，加到培养细胞中，并立即将其置入缺氧培养箱中，进行3-4个小时的缺氧处理。旋转三通管6开关，关闭流向氮气进气管1的方向，高纯氮气经过三通管后仅流向培养箱。