[实用新型]用于活体脑片或脊髓片孵育的灌流装置

说明书

技术领域

本实用新型涉及一种生物组织切片孵育设备，特别是涉及一种用于活体脑片或脊髓片孵育的灌流装置。

背景技术

1966年，Yamamoto和McIlwain首次在脑片上记录了电生理活动（Yamamoto C,McIlwain H.Potentials evoked in vitro in preparations from the mammalian brain.Nature，1966,210(5040):1055-1056），证实了脑组织在体外也能存活，并保持很好的活性状态。此方法的建立，极大推动了神经电生理研究的进程。1989年，Blanton将脑片电生理记录与细胞的膜片钳记录结合起来（Yamamoto C,McIlwain H.Electrical activities in thin sections from the mammalian brain maintained in chemically-defined media in vitro.J Neurochem.1966,13(12):1333-43），建立了脑片膜片钳记录技术，这成为神经生物学发展的里程碑。为了研究神经网络中神经元之间的相互联系，Yuste R和Katz LC首次在大鼠和猫的脑片中记录到了钙离子的动态信息（Yuste R,Katz LC.Control of postsynaptic Ca2+influx in developing neocortex by excitatory and inhibitory neurotransmitters.Neuron.1991Mar;6(3):333-44），从而创造了一种能实时记录神经网络内大量神经元动作电位的方法—功能型多神经元钙成像技术。

其中，用于电生理记录或功能钙成像的脑片或脊髓片都需要保持很高的活性，这是实验顺利进行的重要条件。活体脑片、脊髓片需要在活体上低温取材，随后置于充有混合气（95%O₂，5%CO₂)的人工脑脊液（ACSF）中孵育，30-35℃保温，期间要不断的充入混合气，这有效的保持了脑片的活性。当前用于制作活体脑片的工具多为自制，或用烧杯代替。

目前常规的技术中，一般是将配好的ACSF液倒入大烧杯内，同时不断的通入混合气，盛有脑片或脊髓片的孵育槽漂浮于ACSF液面上方。有人通过在孵育槽中心设多个孵育孔对混合气流量的控制进行了改进，虽然通过改进保证了气流的均匀，但仍不能使孵育槽充分进入ACSF液保持充分的物质交换；还有人通过设置滤网结构使脑片能充分的与液体接触，以便于更好的保持脑片活性，但其装置各个小室互不连通，通气和灌流都很难进行。

并且，常规技术都为传统意义上的孵育，不涉及灌流。在活体脑片或脊髓片的孵育过程中，会不断的与外界进行物质交换，吸收外界营养物质，排除代谢产物。普通的通气孵育会随着孵育时间的延长，导致外界营养物质减少，代谢废物逐渐增多，不利于保持脑片的活性。

发明内容

基于此，本实用新型的目的在于克服现有技术的缺陷，提供一种用于活体脑片或脊髓片孵育的灌流装置，能够实现灌流孵育，随着液体的不断更换，使营养物质不断更新，代谢废物不断排出，利于保持脑片或脊髓片的活性。

为实现上述目的，本实用新型采取以下技术方案：

一种用于活体脑片或脊髓片孵育的灌流装置，包括孵育盘和孵育槽；还包括输入管、输出管和孵育架；所述输入管和输出管分别连通孵育盘的内部空间，所述孵育架置于孵育盘内，且该孵育架的底部和/或侧壁设有连通孵育盘内部空间的镂空部，所述孵育槽置于孵育架上。

采用上述灌流装置，在孵育活体脑片或脊髓片的过程中，将活体脑片或脊髓片放入孵育槽中，又将孵育槽放入孵育架上，由于孵育架的底部和/或侧壁设有连通孵育盘内部空间的镂空部，因此，当通过输入管不断输入混合气或ACSF液时，混合气或ACSF液能透过该镂空部与孵育槽内的活体脑片或脊髓片进行物质交换，并将产生的代谢产物随着ACSF液由输出管排出，有利于保持脑片或脊髓片的活性。

在其中一个实施例中，所述孵育架包括连接部和至少两条侧向支架；所述侧向支架为条状，所述连接部位于侧向支架顶部，侧向支架通过连接部连接为一体，所述侧向支架中部还设有横向延伸的支撑托，该侧向支架、连接部和支撑托共同形成具有容纳腔的桶状结构，所述孵育槽置于该容纳腔内。采用上述结构，可以使孵育盘中的ACSF液由孵育槽的底部及四周与其进行充分的物质交换。