[实用新型]黄瓜绿斑驳花叶病毒快速检测盒

说明书

技术领域

本实用新型涉及生物检测领域，具体涉及一种用免疫层析技术检测植物黄瓜绿斑驳花叶病毒感染的装置。

背景技术

黄瓜绿斑驳花叶病毒（Cucumber green mottle mosaic virus）是重要的植物检疫性病毒之一，可导致作物产量损失达15%，对葫芦科作物的生产造成严重威胁。2005年辽宁省盖州市西瓜感染了黄瓜绿斑驳花叶病毒，损失惨重。此后在广西、辽宁、河北、山东、广东和北京等地陆续发现疫情，已严重威胁着西瓜、甜瓜、黄瓜等作物的生产，因此加强该病毒的检测极为重要。

防止来自疫区携带黄瓜绿斑驳花叶病毒的种子进境和传播是控制该病毒传入和扩散的前提；加强疫情监测并采取有效的根除措施，是防止病害扩散流行的关键。目前，实验室对该病毒的快速检测常用ELISA和PCR等分子生物学检测方法。ELISA试剂盒存在着检测试剂极其昂贵的缺点，PCR方法则存在着操作繁琐，无法实施田间大面积监测的缺点。因此，简便易行的快速检测方法对于黄瓜绿斑驳病毒疫情的防控具有重要意义。

免疫层析技术是上世纪90年代发展起来的一种基于抗原抗体反应的简便快速检测技术，该技术已经广泛应用于临床、食品安全检测领域。胶体金免疫层析检测试纸条是体外快速检测试剂的主要品种之一。以其快速、简便、价廉、所用样品量少、可以直接测定未经处理的样品、污染小、不需要贵重仪器、可以直观判断结果、易于基层和现场使用等优点，而得到广泛应用。但是胶体金免疫层析试纸条的灵敏性不够理想，这大大限制了它在检测领域中的广泛应用。

采用比纳米金颗粒信号更为强的标记物质即可在一定程度上提高免疫层析试纸条的灵敏性。新型的荧光纳米颗粒恰恰具有这样一种优势。荧光纳米颗粒是将荧光物质（如FITC、量子点、稀土螯合物）包裹在高分子材料中，形成纳米颗粒（Nanoparticles，NPs）。包裹作用一方面能使更多的发光分子连接在生物分子上起到信号放大作用，另一方面可克服外界环境对发光试剂的影响(如淬灭作用等)，增加发光试剂的稳定性。包裹着荧光分子或其它发光分子的纳米颗粒比单个荧光分子有高得多的发光强度和光化学稳定性。荧光纳米颗粒还具有颗粒均一，大小任意可调等优势；尤其是在标记方面，完全摒弃了胶体金依靠被动物理吸附的标记方式，采用定向共价偶联技术，几乎完整保持了抗体和抗原的活性，使检测的背景噪音大大降低。采用相同的抗原和抗体试剂，荧光纳米颗粒在灵敏性上可以轻易超出胶体金1-2个数量级，是极有应用前景的生物分子标记材料。

发明内容

本实用新型的目的在于提供一种使用方便，灵敏度高的针对黄瓜绿斑驳花叶病毒快速检测装置，用于植物黄瓜绿斑驳花叶病毒感染的现场快速检测。

本实用新型公开一种黄瓜绿斑驳花叶病毒快速检测盒，包括盒盖、盒身和试纸条，盒盖上设置用于收纳荧光纳米颗粒-黄瓜绿斑驳花叶病毒抗体偶联物的反应槽，盒身内设置试纸条收纳位；所述的试纸条是黄瓜绿斑驳花叶病毒快速检测试纸条，由底板和附着在底板上依次紧密相接的样品垫、层析膜和吸水垫组成，所述的层析膜上设有检测区和质控区，检测区固定与黄瓜绿斑驳花叶病毒发生特异性反应的单克隆抗体或多克隆抗体。所述黄瓜绿斑驳花叶病毒快速检测盒的形式更有有益于产品的保存和使用，检测时荧光纳米颗粒-黄瓜绿斑驳花叶病毒抗体偶联物与检测样品充分接触，更有助于阳性样品的检出，并且时间证明有非常高的灵敏度。

为适用不同情况下的黄瓜绿斑驳花叶病毒快速检测，本实用新型所述的黄瓜绿斑驳花叶病毒快速检测盒可制备为各种具体的实施方式。

为实现多次使用的目的，本实用新型的黄瓜绿斑驳花叶病毒快速检测盒的具体实施方式之一是在所述的盒身内设置试剂瓶收纳位，所述的试剂瓶收纳位放置收纳了荧光纳米颗粒-黄瓜绿斑驳花叶病毒抗体偶联物的棕色试剂瓶。试剂瓶中预先灌入可供多次使用量的荧光纳米颗粒-黄瓜绿斑驳花叶病毒抗体偶联物反应液。使用时，向反应槽中倒入一次检测量的反应液，即可进行后续检验。为了避免所述荧光纳米颗粒-黄瓜绿斑驳花叶病毒抗体偶联物的失活，该实施方式下的黄瓜绿斑驳花叶病毒快速检测盒需要于4℃度保存。