[实用新型]一种检测腹泻病毒的免疫斑点联合试剂盒

说明书

技术领域：

本实用新型涉及一种检测腹泻病毒的免疫斑点（竞争法）联合试剂盒，属于医疗检测腹泻病毒的联合试剂盒技术领域。 

背景技术：

腹泻是世界范围内常见病和多发病，在发展中国家病毒性腹泻是引起儿童肠胃性疾病的主要原因之一，每年可导致约20万儿童死亡。引起婴幼儿腹泻的常见病原体有轮状病毒(RV)、腺病毒(Ad)、柯萨奇病毒(CV)、诺如病毒(NV)和星状病毒(AstV)等。 

我国系统监测急性胃肠炎是世界范围最常见的影响公共健康的问题之一，其严重程度仅次于呼吸道疾病，是导致5岁以内儿童发病和死亡的常见原因。腹泻疾病是世界范围内儿童发病和死亡的主要原因，每年全球大约有210万儿童死于腹泻疾病及其相关的并发症。据世界卫生组织报道，导致儿童死亡的原因中腹泻占18％，尤以发展中国家居多。而我国随着快速城市化建设，越来越多的农村人口涌入城市，仅2003年就有643万儿童随父母入城生活，由此给流动人口儿童免疫卫生及疾病预防带来了极大的挑战。 

婴幼儿腹泻是小儿最常见的疾病之一，具有较高的发病率，被我国列为小儿“四病”防治范围之一。在所有5岁以下腹泻住院儿童中，病毒性腹泻在发达国家和发展中国家中都约占50％比例。由于腹泻病毒在不同地区的流行状况通常不同，在我国引起腹泻的病毒主要有轮状病毒(RV)、腺病毒(Ad)、柯萨奇病毒(CV)等，其中以轮状病毒（RV）最为普遍。 

腹泻疾病不仅危害人类健康，还给社会带来严重的疾病负担和经济负担，是各国十分关注的公共卫生问题。目前应用免疫斑点法检测腹泻病毒采用每项病毒的检测单独操作完成，各种试剂均为分散放置，没有特制的反应板，所以存在检测过程复杂、时间长、携带及操作不方便的缺点。 

发明内容：

本发明的目的在于克服现有技术的缺点，提供一种一次性检测腹泻病毒的免疫斑点联合试剂盒。把三种不同的腹泻病毒检测放到一个反应板上，一次性操作即可得出三种病毒的检测结果，减少了频繁的操作程序，节约人力、物力、节省时间，易于观察并做出判断。 

为了实现上述发明目的，本实用新型一种检测腹泻病毒的免疫斑点联合试剂盒设有载体板、轮状病毒抗体检测点、腺病毒抗体检测点、柯萨奇病毒抗体检测点、对照点和硝酸纤维素膜（NC膜）；硝酸纤维素膜粘贴在载体板的表面；轮状病毒抗体检测点、腺病毒抗体检测点、柯萨奇病毒抗体检测点、各病毒对照点依次设在硝酸纤维素膜上；在各病毒抗体检测点和对照点四周制有温育槽；在轮状病毒抗体检测点、腺病毒抗体检测点、柯萨奇病毒抗体检 测点处分别包被对应的抗原；在三个对照点处分别包被轮状病毒、腺病毒、柯萨奇病毒抗原；和载体板之外的碱性磷酸酶标记的轮状病毒抗体、腺病毒抗体、柯萨奇病毒抗体及其底物（硝基蓝四唑和5-溴-4-氯-3-吲哚基-磷酸盐体积比例为1：49的混合物）共同组成腹泻病毒的免疫斑点联合试剂盒。 

本实用新型一次性快速检测三种腹泻病毒，操作简单，成本低、设计新颖，易于观察并做出诊断。 

附图说明：

图1为检测腹泻病毒的免疫斑点联合试剂盒结构示意图。 

具体实施方式：

下面通过具体实施例和附图对本实用新型做进一步阐述。 

实施例1、 

本实用新型设有载体板1、硝酸纤维素膜2、轮状病毒抗体检测点3、腺病毒抗体检测点4、柯萨奇病毒抗体检测点5、轮状病毒对照点6、腺病毒对照点7、柯萨奇病毒对照点8；硝酸纤维素膜2粘贴在载体板1的表面；轮状病毒抗体检测点3、腺病毒抗体检测点4、柯萨奇病毒抗体检测点5、病毒对照点6-8依次设在硝酸纤维素膜2上；在各检测点和对照点四周制有温育槽9；在轮状病毒抗体检测点3、腺病毒抗体检测点4、柯萨奇病毒抗体检测点5处分别包被对应的抗原；在各病毒对照点6-8处分别包被轮状病毒、腺病毒、柯萨奇病毒抗原；和载体板1之外的碱性磷酸酶标记的轮状病毒抗体、腺病毒抗体、柯萨奇病毒抗体及其底物（硝基蓝四唑和5-溴-4-氯-3-吲哚基-磷酸盐体积比例为1：49的混合物）共同组成腹泻病毒的免疫斑点联合试剂盒。 

实施例2、本实用新型的制备方法 

1）轮状病毒抗原、腺病毒抗原、柯萨奇病毒抗原；碱性磷酸酶标记的轮状病毒抗体、腺病毒抗体、柯萨奇病毒抗体市售购买。 

2）硝酸纤维素膜的点样 

在硝酸纤维素膜的检测点包被轮状病毒抗原、腺病毒抗原、柯萨奇病毒抗原；在对照点处分别包被轮状病毒抗原、腺病毒抗原、柯萨奇病毒抗原。 

3）制备免疫斑点试剂盒