[发明专利]葡萄糖二酸的制造方法

权利要求书

1.一种葡萄糖二酸的制造方法，其包括下述工序：

1)准备转化体的工序，该转化体保有肌醇-1-磷酸合成酶基因、肌醇单磷酸酶基因、肌肉肌醇加氧酶基因和糖醛酸脱氢酶基因，并具有对该转化体内的功能性肌醇单磷酸酶的过剩生产或肌醇单磷酸酶的活化进行诱导的基因重组或变异；

2)在适于所述转化体的生长和/或维持的条件下，使该转化体与能够由该转化体转换为葡萄糖二酸的碳源进行接触的工序；以及

3)从在所述2)中得到的培养物中分离出葡萄糖二酸或者葡萄糖二酸盐的工序。

2.如权利要求1所述的制造方法，其中，所述碳源包括可在所述转化体内转换为葡萄糖-6-磷酸的化合物。

3.如权利要求2所述的制造方法，其中，所述碳源为选自由D-葡萄糖、蔗糖、寡糖、多糖、淀粉、纤维素、米糠、废糖蜜以及含有D-葡萄糖的生物物质组成的组中的1种以上。

4.如权利要求1～3的任一项所述的制造方法，其特征在于，所述转化体来源于不具有肌肉肌醇同化能力的微生物。

5.如权利要求1～4的任一项所述的制造方法，其中，所述转化体来源于选自由大肠杆菌、芽胞杆菌属细菌、棒状杆菌属细菌、发酵单胞菌属细菌组成的组中的细菌。

6.如权利要求1～5的任一项所述的制造方法，其中，所述肌醇单磷酸酶的过剩生产是通过对所述转化体进行以下操作而被诱导的：

a)导入外来肌醇单磷酸酶基因；

b)增加内源性肌醇单磷酸酶基因的拷贝数；

c)在内源性肌醇单磷酸酶基因的调整区域导入变异；

d)利用高表达诱导性外来调整区域来置换内源性肌醇单磷酸酶基因的调整区域；或者

e)使内源性肌醇单磷酸酶基因的调整区域缺失。

7.如权利要求6所述的制造方法，其中，所述肌醇单磷酸酶的过剩生产是通过对所述转化体导入外来肌醇单磷酸酶基因而被诱导的。

8.如权利要求1～5的任一项所述的制造方法，其中，所述肌醇单磷酸酶的活化是通过对所述转化体进行以下操作而被诱导的：

f)在内源性肌醇单磷酸酶基因中导入变异；

g)置换内源性肌醇单磷酸酶基因的一部分或全部；

h)使内源性肌醇单磷酸酶基因的一部分缺失；

i)使降低肌醇单磷酸酶活性的其它蛋白质减少；

j)使降低肌醇单磷酸酶活性的化合物的生成减少。

9.一种转化体，该转化体保有肌醇-1-磷酸合成酶基因、肌醇单磷酸酶基因、肌肉肌醇加氧酶基因和糖醛酸脱氢酶基因，并且具有对该转化体内的功能性肌醇单磷酸酶的过剩生产或肌醇单磷酸酶的活化进行诱导的基因重组或变异。

10.如权利要求9所述的转化体，其特征在于，所述转化体来源于不具有肌肉肌醇同化能力的微生物。

11.如权利要求9或10所述的转化体，其中，所述转化体来源于选自由大肠杆菌、芽胞杆菌属细菌、棒状杆菌属细菌、发酵单胞菌属细菌组成的组中的细菌。

12.如权利要求9～11的任一项所述的转化体，其中，所述肌醇单磷酸酶的过剩生产是通过对所述转化体进行以下操作而被诱导的：

a)导入外来肌醇单磷酸酶基因；

b)增加内源性肌醇单磷酸酶基因的拷贝数；

c)在内源性肌醇单磷酸酶基因的调整区域导入变异；

d)利用高表达诱导性外来调整区域来置换内源性肌醇单磷酸酶基因的调整区域；或者

e)使内源性肌醇单磷酸酶基因的调整区域缺失。

13.如权利要求12所述的转化体，其中，所述肌醇单磷酸酶的过剩生产是通过对所述转化体导入外来肌醇单磷酸酶基因而被诱导的。

14.如权利要求9～11的任一项所述的转化体，其中，所述肌醇单磷酸酶的活化是通过对所述转化体进行以下操作而被诱导的：

f)在内源性肌醇单磷酸酶基因中导入变异；

g)置换内源性肌醇单磷酸酶基因的一部分或全部；

h)使内源性肌醇单磷酸酶基因的一部分缺失；

i)使降低肌醇单磷酸酶活性的其它蛋白质减少；

j)使降低肌醇单磷酸酶活性的化合物的生成减少。