[发明专利]植物细胞堆叠的产生和培养方法

权利要求书

1.一种去除了培养基且多孔结构的、非组织多层细胞堆叠形式的植物细胞材料的产生和所述细胞堆叠的后续维持的方法，该方法包括下述步骤：(i)通过从植物细胞悬浮培养物中分离细胞而提供具有多孔结构的细胞堆叠，其中，使细胞堆叠所包含的液体的含量降低并调整为相当于0.1g～0.9g湿细胞重量/cm³的细胞堆叠密度，从而建立所述细胞堆叠的去除了培养基且多孔结构的性质，以及(ii)将去除了培养基且多孔结构的所述细胞堆叠在非液体环境中以50～100％的相对湿度进行培育，其中，培养步骤(ii)是在没有将去除了培养基且多孔结构的细胞堆叠放置在维持培养基或生长培养基上或者没有接触维持培养基或生长培养基的情况下实施的。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，使细胞堆叠所包含的液体的含量降低并调整为相当于在0.2g～0.85g湿细胞重量/cm³之间的细胞堆叠密度。

3.根据权利要求2所述的方法，其中，使细胞堆叠所包含的液体的含量降低并调整为相当于在0.4g～0.8g湿细胞重量/cm³之间的细胞堆叠密度。

4.根据权利要求1至3中的任一项所述的方法，其中，从所述植物细胞悬浮培养物中分离的细胞是天然的或转基因的，并且能够积累所期望的产物。

5.根据权利要求1所述的方法，其中，从所述植物细胞悬浮培养物中分离的细胞是天然的或转基因的，并且能够积累所期望的产物。

6.根据权利要求4所述的方法，其中，所述转基因细胞被瞬时转化或稳定转化以积累所述所期望的产物。

7.根据权利要求5所述的方法，其中，所述转基因细胞被瞬时转化或稳定转化以积累所述所期望的产物。

8.根据权利要求1所述的方法，其中，在进入步骤(ii)前，将步骤(i)所提供的细胞堆叠所包含的细胞与至少一个表达载体瞬时转化，所述表达载体包含至少一种异源核酸序列，所述至少一种异源核酸序列编码所期望的产物。

9.根据权利要求1至3、5至8中的任一项所述的方法，其中，步骤(ii)包括积累和收获所期望的产物。

10.根据权利要求1所述的方法，其中，步骤(ii)包括积累和收获所期望的产物。

11.根据权利要求4所述的方法，其中，步骤(ii)包括积累和收获所期望的产物。

12.根据权利要求4所述的方法，其中，所期望的产物选自天然和异源蛋白质或多肽、次生代谢物、标记物和分析/诊断结果。

13.根据权利要求5-8、10-11中的任一项所述的方法，其中，所期望的产物选自天然和异源蛋白质或多肽、次生代谢物、标记物和分析/诊断结果。

14.根据权利要求9所述的方法，其中，所期望的产物选自天然和异源蛋白质或多肽、次生代谢物、标记物和分析/诊断结果。

15.一种去除了培养基且多孔结构的非组织多层细胞堆叠形式的植物细胞材料，密度在0.1g～0.9g湿细胞重量/cm³之间，是由权利要求1～14中的任一项所述的方法获得的。

16.根据权利要求15所述的植物细胞材料，所述植物细胞材料的密度在0.2g～0.85g湿细胞重量/cm³之间。

17.根据权利要求15所述的植物细胞材料，所述植物细胞材料的密度在0.4g～0.8g湿细胞重量/cm³之间。

18.由权利要求1～14中的任一项所述的方法获得的、去除了培养基且多孔结构的非组织多层细胞堆叠形式的植物细胞材料在分析方面的应用。

19.根据权利要求18所述的应用，其中，细胞堆叠所包含的细胞在待分析的生物或者待分析的物质的存在下进行培育。

20.一种诊断工具，包括由权利要求1～14中的任一项所述的方法获得的、去除了培养基且多孔结构的非组织多层细胞堆叠形式的植物细胞材料。