[发明专利]工程化的杀有害生物蛋白质

权利要求书

1.一种工程化的来自苏云金芽孢杆菌的Vip3杀有害生物多肽，其在对应于SEQ ID NO:1的位置K455的位置处具有氨基酸突变，其中相比于该工程化的多肽所衍生自的野生型多肽的ECB活性而言，该突变改进了该工程化的多肽针对至少欧洲玉米螟(ECB)的杀有害生物活性，并且其中该氨基酸突变对应于从由以下各项组成的组中选择的突变：K455A、K455G、K455I和K455E。

2.根据权利要求1所述的工程化的Vip3杀有害生物多肽，其中该氨基酸突变在位置K455处，其中相比于SEQ ID NO:1的野生型多肽的ECB活性而言，该突变改进了该工程化的多肽针对至少欧洲玉米螟(ECB)的杀有害生物活性，并且其中该氨基酸突变选自由以下各项组成的组：K455A、K455G、K455I和K455E。

3.如权利要求1所述的工程化的Vip3杀有害生物多肽，其进一步在对应于SEQ ID NO:1的位置V338的位置处包含氨基酸突变，其中相比于该工程化的多肽所衍生自的野生型多肽的ECB活性而言，该突变改进了该工程化的多肽针对至少欧洲玉米螟(ECB)的杀有害生物活性，并且其中该氨基酸突变对应于K455A和V338A的突变。

4.如权利要求3所述的工程化的Vip3杀有害生物多肽，其中该氨基酸突变是K455A和V338A的突变。

5.如权利要求2所述的工程化的Vip3杀有害生物多肽，其中该多肽由从由以下各项组成的组中选择的氨基酸序列组成：SEQ ID NO:3的氨基酸序列、SEQ ID NO:5的氨基酸序列和SEQ ID NO:117的氨基酸序列。

6.一种重组核酸分子，其由编码如权利要求1至5中任一项所述的多肽的核苷酸序列组成。

7.如权利要求6所述的重组核酸分子，其中该核苷酸序列选自由以下各项组成的组：SEQ ID NO:4的核苷酸序列、SEQ ID NO:6的核苷酸序列和SEQ ID NO:118的核苷酸序列。

8.如权利要求6或权利要求7所述的重组核酸分子，其中该核苷酸序列与启动子可操作地关联。

9.一种重组载体，其包含如权利要求8所述的核酸分子。

10.一种组合物，其在农业上可接受的载体中包含如权利要求1至5中任一项所述的工程化的多肽。

11.一种产生具有针对至少欧洲玉米钻蛀虫的杀有害生物活性的多肽的方法，包括：

在转基因非人类宿主细胞中表达如权利要求6至8中任一项所述的重组核酸分子，从而生产具有针对至少欧洲玉米钻蛀虫的杀有害生物活性的多肽。

12.如权利要求11所述的方法，其中该多肽具有针对至少一种另外的昆虫的杀有害生物活性，其中所述昆虫选自由以下各项组成的组：小菜蛾、草地贪夜蛾、小地老虎、谷实夜蛾、烟芽夜蛾、甜菜夜蛾、茶色铃夜蛾、棉铃虫、烟草天蛾、粉纹夜蛾、红铃麦蛾、向日葵细卷叶蛾及其任意组合。

13.一种产生抗有害生物的转基因植物的方法，该方法包括：向植物中引入如权利要求6至8中任一项所述的重组核酸分子，其中该核苷酸序列在该植物中表达，从而赋予该植物对至少欧洲玉米钻蛀虫的抗性，并产生抗有害生物的转基因植物。

14.根据权利要求13所述的方法，其中该转基因植物对从由以下各项组成的组中选择的至少一种另外的有害生物具有抗性：小菜蛾、草地贪夜蛾、小地老虎、谷实夜蛾、烟芽夜蛾、甜菜夜蛾、茶色铃夜蛾、棉铃虫、烟草天蛾、粉纹夜蛾、红铃麦蛾、向日葵细卷叶蛾及其任意组合。

15.一种控制至少欧洲玉米钻蛀虫昆虫的方法，该方法包括向这些昆虫递送有效量的如权利要求1至5中任一项所述的多肽。