[发明专利]自体癌细胞疫苗

权利要求书

1.用于制备分离的免疫原性癌细胞或其包含MHCI和MHCII两者的免疫原性提取物的方法，所述方法包括：

-从活检程序过程或肿瘤的手术去除过程获得的样品中分离癌细胞；

-诱导从受试者分离的癌细胞上MHCII的表达；

-将所述癌细胞与非自身抗原孵育，使得所述非自身抗原结合表达的MHCII，其中所述非自身抗原选自甲状腺球蛋白、β-半乳糖苷酶、葡聚糖、聚赖氨酸、结核菌素衍生蛋白、卵清蛋白(OVA)、血清白蛋白、钥孔血蓝蛋白(KLH)及其组合；

-杀死所述癌细胞；和

-在MHCII诱导后鉴定MHCII阳性细胞。

2.权利要求1所述的方法，其中所述在MHCII诱导后鉴定MHCII阳性细胞是在将所述癌细胞与非自身抗原孵育之后和在杀死所述癌细胞之前。

3.权利要求2所述的方法，其进一步包括将MHCII阳性癌细胞与MHCII阴性癌细胞分离，以获得包含MHCII阳性细胞的纯化的组合物。

4.权利要求1所述的方法，其进一步包括冷冻保存所述杀死的癌细胞。

5.权利要求1所述的方法，其中通过致死照射、在不存在冷冻保存剂的情况下冷冻和解冻、或用细胞毒性化合物处理来杀死所述细胞。

6.权利要求1所述的方法，其中使用MHCII诱导剂诱导所述癌细胞上的MHCII。

7.权利要求6所述的方法，其中所述MHCII诱导剂是细胞因子、MHCII表达构建体或将与所述癌细胞融合的MHCII表达细胞。

8.权利要求7所述的方法，其中所述细胞因子是IFN-α、IFN-β、IFN-γ、IL-4、IL-13、IL-23、TNF-α或其组合。

9.权利要求8所述的方法，其中所述细胞因子是IFN-γ。

10.权利要求1所述的方法，其中所述非自身抗原是非人抗原。

11.权利要求1所述的方法，其中所述非自身抗原是牛血清白蛋白(BSA)、绵羊血清白蛋白、山羊血清白蛋白或鱼血清白蛋白。

12.权利要求1所述的方法，其中所述非自身抗原不是牛抗原。

13.权利要求12所述的方法，其中所述非自身抗原不是牛血清白蛋白(BSA)。

14.权利要求1所述的方法，其中所述诱导步骤是在不含牛血清白蛋白(BSA)的培养基中。

15.权利要求1所述的方法，其中所述癌细胞源自实体瘤。

16.权利要求15所述的方法，其中所述实体瘤选自乳腺癌、结肠直肠癌、黑素瘤、卵巢癌、胰腺癌、胃癌和前列腺癌。

17.权利要求16所述的方法，其中所述实体瘤是前列腺癌。

18.其细胞表面上表达MHCI和MHCII两者的分离的免疫原性癌细胞或所述分离的免疫原性癌细胞的、包含MHCI和MHCII两者的免疫原性提取物，其中癌抗原结合所述MHCI且非自身抗原结合所述MHCII，其中所述非自身抗原选自甲状腺球蛋白、β-半乳糖苷酶、葡聚糖、聚赖氨酸、结核菌素衍生蛋白、卵清蛋白(OVA)、牛血清白蛋白(BSA)、绵羊血清白蛋白、山羊血清白蛋白、或鱼血清白蛋白和钥孔血蓝蛋白(KLH)及其组合。