[发明专利]与胰岛素受体族反应抗体结合性能调节剂之识别

说明书

简述：

本发明涉及一种方法和试剂盒，用以与一种或多种胰岛素族受体反应的抗体结合性能调节剂的识别，以及抗体检测方法。

发明背景：

胰岛素受体家族(IRF)主要含四种与胰岛素和/或IGF-1以不同的亲和力结合的受体：胰岛素受体(IR)，IGF1受体(IGF1R)和IGF2受体(IGF2R)，和胰岛素-IGF1混合受体(IIHR)。另一个孤立成员是胰岛素受体相关受体(IRRR)。

上述受体中，IR，IGF1R，IIHR和IRRR属于配体活化的酪氨酸激酶受体，而IGF2R是具有大的细胞外结构域的跨膜单体，没有内信源能力。

IR和IGF1R在细胞表面表达为两个相同单体组成的同源二聚体，或者为包含两个不同受体单体的异二聚体(例如，胰岛素-IGF1混合受体(IIHR))。IIHR广泛分布在各种哺乳动物组织内。他们对于配体诱导的酪氨酸磷酸化的信号的行为与IGF1R类似。

IGF1R和IR受体都含有两个α和两个β糖基化亚基，其中两个跨膜α-β链一起形成二硫键链异四聚体(β-α-α-β)。该受体有一个胞外配体结合域，一个跨膜结构域和表现出酪氨酸激酶活性的胞质结构域。胞外结构域包含整个α亚基和β亚基的N末端的一部分，而胞内部分的β亚基含有酪氨酸激酶(TK)结构域。虽然在结构上相似，IGF1R和IR服务于不同的生理功能。IR主要参与代谢功能，而IGF1R调节生长和分化。但是，与受体结合时，它们的配体胰岛素和IGF-1可诱导有丝分裂和代谢两种作用方式。

由于IRF族成员的结构特点，胰岛素配体不仅结合IR，还能结合IGF1R和IIHR；IGF-1配体不仅结合IGF1R，还能结合IR，IIHR和IGF2R；IGF-2配体不仅结合IGF2R，还能结合IR，IIHR和IGF1R。

已知自身抗体在自体免疫紊乱的产生中起重要作用，例如，受试者存在对IR的自身抗体则表明糖尿病发病(B型胰岛素抵抗)。

针对IGF1R的非内源性抗体目前正在开发中，以提供新颖的癌症治疗方法。例如，针对IGF1R的治疗性单克隆抗体，辉瑞公司的候选药物figitumumab，和默克公司的dalatozumab，目前正在研究其对不同类型癌症的治疗作用。又例如，专利申请WO2002/053596A，WO2004/083248A，WO2005/016967A，WO2005/016970A，US 2005/0249730，US2005/0084906，WO2005/052005A，WO2005/058967A，WO2005/094376A，WO2006/008639A，WO2006/013472A和WO2008/077546等---均涉及IGF1R抗体治疗癌症的手段。

与IRF族受体成员结合的自身抗体的产生机制和作用尚未完全清楚，需要进一步调查才能成功用于诊断，预防和治疗自身免疫性疾病(例如，胰岛素依赖型糖尿病(IDDM)，弥漫性毒性甲状腺肿)，肥胖症，神经性疾病，生长障碍，癌症的生成和发展(包括乳腺癌，结肠癌，卵巢癌，前列腺癌，肺癌)，和其它细胞增殖性疾病及其他疾病或功能障碍。例如，已经报道了包括I型和II型糖尿病，老年痴呆，和癌症等疾病中的IR信源功能失调现象。

更专门的、更灵敏的检测方法可以帮助深入了解这些复杂的机理，并成为这方面诊断和研究的有价值的工具，例如，允许判别健康个体和逐渐功能障碍者不同的生理状态。特别是，对IRF族自身抗体的血清测定标记对早期诊断或鉴别，对预防和/或治疗任何上述的自身免疫性疾病大有益处。

本发明的改进是可以识别与IRF族成员，和影响或触发受体活性的抗体反应的调节剂(即激活剂，抑制剂，或称影响或触发分子)，因此适合作为药学有效化合物用于诊断、预防和/或治疗与IRF族成员有关的疾病。

W.Minich等已经演示了稳定转染HEK293细胞，重组人体IGF1R-萤光素酶融合蛋白的表达(《甲亢病人发光免疫沉淀分析检测对类胰岛素生长因子-1的自身抗体》。ITC会议墙报发表，2010年巴黎)，表明如何用免疫沉淀分析(IPA)对甲亢患者的血清样本进行IGF1R自身抗体的定量分析。