[发明专利]变体蔗糖转运蛋白多肽无效
申请号: | 201380012343.3 | 申请日: | 2013-03-05 |
公开(公告)号: | CN104245723A | 公开(公告)日: | 2014-12-24 |
发明(设计)人: | D.M.W.波拉克;T.K.范德克 | 申请(专利权)人: | 纳幕尔杜邦公司 |
主分类号: | C07K14/195 | 分类号: | C07K14/195 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 李波;李炳爱 |
地址: | 美国特拉华*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 变体 蔗糖 转运 蛋白 多肽 | ||
1.变体蔗糖转运蛋白多肽,基于Clustal W比对方法,所述变体蔗糖转运蛋白多肽具有的氨基酸序列与如SEQ ID NO:26所示的氨基酸序列具有至少95%的同一性,并且所述变体蔗糖转运蛋白多肽具有在位置300处的精氨酸至丙氨酸或精氨酸至亮氨酸的氨基酸改变并包含:
(a)至少一种另外的氨基酸改变,所述另外的氨基酸改变选自:
(i)在位置353处的谷氨酰胺至组氨酸;
(ii)在位置61处的亮氨酸至脯氨酸;
(iii)在位置159处的苯丙氨酸至亮氨酸;
(iv)在位置162处的甘氨酸至半胱氨酸;
(v)在位置169处的脯氨酸至组氨酸;
(vi)在位置61处的亮氨酸至色氨酸;
(vii)在位置61处的亮氨酸至组氨酸;
(viii)在位置61处的亮氨酸至苯丙氨酸;和
(ix)在位置61处的亮氨酸至酪氨酸;或
(b)从N-末端起402至407个氨基酸的长度;或
(c)从N-末端起402至407个氨基酸的长度,并且具有(a)的氨基酸改变中的至少一种。
2.变体蔗糖转运蛋白多肽,基于Clustal W比对方法,所述变体蔗糖转运蛋白多肽具有的氨基酸序列与选自SEQ ID NO:68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96和98的氨基酸序列具有至少95%的同一性,并且在与SEQ ID NO:26的参照氨基酸序列进行比较时,所述变体蔗糖转运蛋白多肽包含在等同位置处的氨基酸,所述在等同位置处的氨基酸选自:
(a)在等同于位置300的位置处的丙氨酸;和
(b)在等同于位置300的位置处的亮氨酸。
3.根据权利要求2所述的变体蔗糖转运蛋白多肽,其中所述变体蔗糖转运蛋白多肽还包含:
(a)在与SEQ ID NO:26的参照氨基酸序列进行比较时,下列在等同位置处的氨基酸中的至少一种:
(i)在等同于位置353的位置处的组氨酸;
(ii)在等同于位置61的位置处的脯氨酸;
(iii)在等同于位置159的位置处的亮氨酸;
(iv)在等同于位置162的位置处的半胱氨酸;
(v)在等同于位置169的位置处的组氨酸;
(vi)在等同于位置61的位置处的色氨酸;
(vii)在等同于位置61的位置处的组氨酸;
(viii)在等同于位置61的位置处的苯丙氨酸;
(ix)在等同于位置61的位置处的酪氨酸;和/或
(b)在与SEQ ID NO:26的参照氨基酸序列进行比较时,在等同于位置407、406、405、404、403或402的位置处的截短。
4.重组细菌,所述重组细菌在其基因组中或在至少一种重组构建体上包含:
(a)编码变体蔗糖转运蛋白多肽的核苷酸序列,基于Clustal W比对方法,所述变体蔗糖转运蛋白多肽具有的氨基酸序列与选自SEQ ID NO:26、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96和98的氨基酸序列具有至少95%的同一性,并且在与SEQ ID NO:26的参照氨基酸序列进行比较时,所述变体蔗糖转运蛋白多肽具有在等同位置处的氨基酸,所述在等同位置处的氨基酸选自:
(i)在等同于位置300的位置处的丙氨酸;和
(ii)在等同于位置300的位置处的亮氨酸;和
(b)编码具有蔗糖水解酶活性的多肽的核苷酸序列;
其中(a)和(b)各自可操作地连接至相同的或不同的启动子,进一步地,其中所述重组细菌能够代谢蔗糖。
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