[发明专利]抗癌剂的筛选方法、以及以增大颗粒酶M的活性的物质为有效成分的诱导细胞死亡的抗癌剂

说明书

技术领域

本发明涉及抗癌剂的筛选方法、以及以增大颗粒酶M(granzyme M)的活性的物质为有效成分的诱导细胞死亡的抗癌剂。

背景技术

癌症在大多数国家是三大死因之一，社会上迫切希望开发出新型的癌治疗药。至今，开发了大量的抗癌剂，对癌治疗作出了贡献。

作为在免疫学领域中已经确立的生物体内的机理，可以列举使天然杀伤(NK)细胞、细胞毒性T细胞攻击癌细胞、病毒感染细胞，诱导细胞死亡的机理。该机理中，首先，NK细胞、细胞毒性T细胞分泌穿孔素(perforin)，在癌细胞、病毒感染细胞的细胞膜开孔，以该状态分泌颗粒酶，侵入细胞内，分解各种细胞内的蛋白质，由此，诱导细胞死亡(参照图15)。

颗粒酶是丝氨酸蛋白酶，已知在人类中存在A、B、H、K、M五个种类(非专利文献1)。其中，关于颗粒酶B，在膀胱癌细胞中表达，分解周围细胞的细胞外基质，由此显示参与癌的浸润(非专利文献2)。

现有技术文献

非专利文献

非专利文献1：CL Ewen,K P Kane,and RCBleackley.Review.A quarter centyry of granzymes.Cell Death and Differentiation.advance online publication 4November 2011

非专利文献2：D’Eliseo D,Pisu P,Romano C,Tubaro A,De Nunzio C,Morrone S,Santoni A,Stoppacciaro A,Velotti F.Granzyme B is expressed in urothelial carcinoma and promotes cancer cell invasion.Int.J.Cancer 127,1283-1294(2010).

发明内容

发明所要解决的课题

但是，癌的种类多样，新型的抗癌剂的开发在今后也是不可或缺的。因此，为了开发新型的抗癌剂，需要利用以往没有的治疗机理的筛选方法。

本发明是鉴于上述实际情况作出的，目的在于提供利用新型的治疗机理的抗癌剂的筛选方法、以及以增大颗粒酶M的活性的物质为有效成分的诱导细胞死亡的抗癌剂。

用于解决课题的方法

本发明的发明人发现，被认为只存在于NK细胞、细胞毒性T细胞的颗粒酶M意外地在人类血液癌细胞(培养白血病细胞)中具有活性且表达。并且，发现AraC(阿糖胞苷)使颗粒酶M活化，分解作为细胞生存因子的NPM(nucleophosmin，核仁磷酸蛋白)，引起白血病细胞(U937和HL60)的细胞死亡。即，本发明的发明人发现，若使颗粒酶M活化，则可以诱导癌细胞的细胞死亡(apoptosis，凋亡)，从而完成了本发明。具体而言，本发明提供以下的方面。

(1)一种抗癌剂的筛选方法，具有：

对癌细胞投与被检测物质的工序；和

检测上述癌细胞表达的颗粒酶M的活性，选择确认了上述活性的增大的上述被检测物质工序。

(2)一种抗癌剂的筛选方法，具有：

对癌细胞投与被检测物质的工序；和

检测有无通过上述癌细胞表达的颗粒酶M的活化所诱导的所述癌细胞的细胞死亡，选择确认了上述细胞死亡的上述被检测物质的工序。

(3)如(1)或(2)所述的方法，其中，上述癌细胞为实体癌细胞或血液癌细胞。

(4)如(1)～(3)中任一项所述的方法，其中，不对上述癌细胞投与穿孔素。

(5)如(1)～(4)中任一项所述的方法，其中，上述被检测物质为低分子化合物。

(6)一种以增大颗粒酶M的活性的物质为有效成分的诱导细胞死亡的抗癌剂。

(7)如(6)所述的抗癌剂，其中，增大颗粒酶M的活性的物质为AraC，且诱导血液癌细胞的细胞死亡。

(8)如(7)所述的抗癌剂，其中，血液癌为白血病。

(9)如(6)所述的抗癌剂，其中，增大颗粒酶M的活性的物质为顺铂，且诱导实体癌细胞的细胞死亡。

(10)如(9)所述的抗癌剂，其中，实体癌为宫颈癌。

发明的效果

根据本发明，可以提供利用新型的治疗机理的抗癌剂的筛选方法、以及以增大颗粒酶M的活性的物质为有效成分的诱导细胞死亡的抗癌剂。

附图说明

图1是表示假定利用本发明所涉及的筛选方法所得到的候选物质治疗或预防癌的机理的图。