[发明专利]制造用于经皮给药的透明质酸-蛋白结合体的方法以及由该方法制造的用于经皮给药的透明质酸-蛋白结合体

权利要求书

1.一种制造透明质酸-蛋白结合体的方法，包括：

制造由化学式1表示的透明质酸-醛(HA-醛)化合物的第1步骤；和

使该透明质酸-醛与水溶性蛋白的N-末端反应的第2步骤，

[化学式1]

在化学式1中，m和n的合计为50至10000的整数，n是5至5000的整数。

2.如权利要求1所述的方法，其中，该方法包括通过使透明质酸(HA)、透明质酸的盐或透明质酸的衍生物在黑暗条件下与氧化剂反应来对纤维素环进行开环的步骤。

3.如权利要求2所述的方法，其中，透明质酸(HA)、透明质酸的盐或透明质酸的衍生物具有10000至3000000Da的分子量。

4.如权利要求2所述的方法，其中，氧化剂是过碘酸钠。

5.如权利要求2所述的方法，其中，氧化剂以相对于透明质酸、透明质酸的盐或透明质酸的衍生物的摩尔量的1至10摩尔倍的量，与透明质酸、透明质酸的盐或透明质酸的衍生物反应2至24小时。

6.如权利要求1所述的方法，其中，透明质酸-醛化合物具有10至50mol％的醛基取代度。

7.如权利要求1所述的方法，其中，第2步骤在pH5至7的缓冲溶液中进行。

8.如权利要求1所述的方法，其中，缓冲溶液是pH5至6.5的乙酸钠缓冲溶液。

9.如权利要求1所述的方法，其中，透明质酸-蛋白结合体具有结合到1个透明质酸-醛化合物的分子上的1至10个蛋白分子。

10.如权利要求1所述的方法，其中，该方法进一步包括在第2步骤之后使用胺来封闭未与蛋白反应的残留醛基的步骤。

11.如权利要求10所述的方法，其中，胺是C1至C5的直链或支链的肼基甲酸烷基酯或C1至C5的低级烷醇胺。

12.如权利要求11所述的方法，其中，肼基甲酸烷基酯是肼基甲酸乙酯或肼基甲酸叔丁酯，烷醇胺是甲醇胺、乙醇胺、丙醇胺、丁醇胺或戊醇胺。

13.如权利要求10所述的方法，其中，胺是肼基甲酸烷基酯，且以相对于醛基的摩尔量为5至10摩尔倍的肼基甲酸烷基酯反应12至24小时。

14.如权利要求10所述的方法，其中，胺是烷醇胺，且以相对于醛基的摩尔量为5至10摩尔倍的烷醇胺反应12至24小时。

15.如权利要求1所述的方法，其中，水溶性蛋白是人体生长激素、α干扰素、红细胞生成素、肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)、卵清蛋白或胰岛素。

16.一种透明质酸-蛋白结合体，由化学式2表示，并由权利要求1～15中任一项所述的方法来制造，

[化学式2]

化学式2中，

P是水溶性蛋白，

m、n和l的合计为50至10000的整数，

n和l的合计为5至5000的整数，且

l是1至100的整数。

17.一种用于经皮给药的药物组合物，含有权利要求16所述的透明质酸-蛋白结合体。

18.一种化妆品组合物，含有权利要求16所述的透明质酸-蛋白结合体。

19.一种疫苗组合物，含有权利要求16所述的透明质酸-蛋白结合体。

20.一种透明质酸-蛋白结合体的给药方法，包括：

制造由化学式2表示并由权利要求1～15中任一项所述的方法来制造的透明质酸-蛋白结合体；和

对所需对象以有效治疗量给药该透明质酸-蛋白结合体，

[化学式2]

化学式2中，

P是水溶性蛋白，

m、n和l的合计为50至10000的整数，

n和l的合计为5至5000的整数，且

l是1至100的整数。