[发明专利]与CH4和CεmX结构域之间的连接处结合的抗mIgE抗体

说明书

相关申请

本PCT申请要求在2012年4月20日申请的美国临时申请号61/636,618的优先权，其全部内容通过引用纳入本文。

本发明的背景技术

免疫球蛋白E(IgE)在介导造成过敏性疾病的I型超敏反应中起着主导作用,而过敏性疾病包括过敏性哮喘，过敏性鼻炎，特应性皮炎，花生过敏，乳胶过敏及其他过敏性疾病。过敏性反应是免疫系统对无害的环境物质例如灰尘，螨虫，树和草花粉，某些食物和药物，和蜜蜂和火蚁叮咬的反应。在这样的反应中，过敏原与嗜碱性粒细胞和肥大细胞表面的IgE结合引起IgE的交联和IgE.Fc的潜在受体，I型IgE.Fc受体或FcεRI的聚集。该受体聚集随后激活信号传导途径，导致颗粒的胞吐作用和药理介质如组胺，白三烯，胰蛋白酶，细胞因子和趋化因子的释放。肥大细胞和嗜碱性粒细胞的介质的释放引起过敏的各种病理学表现。

抗IgE抗体，例如，奥马佐单抗和TNX-901结合血液和间质液中游离的IgE和B细胞上的mIgE但不结合与嗜碱性粒细胞和肥大细胞上FcεRI结合的IgE，这类抗IgE抗体已被开发用于治疗IgE介导的过敏性疾病。这些抗体在Fc的CH3结构域内的位点与IgE以高亲和性结合，该位点与FcεRI的结合位点重叠。因此，这些抗体的预期疗效是基于抗体与游离的IgE和B淋巴母细胞和记忆B细胞上的mIgE结合，这导致血液和间质液中游离IgE的总水平降低。

奥马佐单抗(商品名Xolair)的临床开发已显示了在各种过敏适应症中减轻I型超敏反应的附加多种药理作用。抗IgE与游离IgE的结合进一步阻止了IgE与嗜碱性粒细胞和肥大细胞表面上FcεRI的结合。由于没有被IgE结合的FcεRI是不稳定而接着被内在化和降解，用抗IgE结合来消耗游离IgE还逐渐下调嗜碱性粒细胞和肥大细胞上的FcεRI。已发现抗体治疗的其它效果的证据，包括细胞因子活性的中和，总体炎症反应的减轻和通过IgE-抗IgE免疫复合物的聚积可能清除过敏原。

CεmX是位于人膜结合ε链(mε)的CH4结构域和C末端膜锚定区段之间的52个氨基酸区段。在大多数研究的人类对象中，无CεmX的mε(mεS)已经显示占极小的比重，而有CεmX的mε链(mεL)显著表达。游离的、分泌的IgE的ε链和mIgE的mεS和mεL的mRNA都来自于εRNA转录产物的选择性剪切。CεmX的氨基酸和核苷酸序列在整个蛋白质和DNA数据库中是独特的。因此，CεmX为靶向mIgE和表达mIgE的B细胞提供了一个独特的抗原位点。为靶向表达mIgE的B淋巴细胞，与存在于人mIgE上的CεmX(也被称作M1'区)结合的抗IgE抗体也已得到开发，例如,a20.Chen等人,J.Immunol.2010；184；1748-1756,美国专利号8,071,097和国际公布号WO2010/097012。

鉴定涉及CεmX结构域的新抗原表位和开发与这样的抗原表位结合的新治疗抗体是具有极大兴趣的。

发明概述

本发明涉及抗体的开发和鉴定，该抗体对人B淋巴细胞上的人mIgE的长同种型CH4结构域和CεmX结构域之间的连接区(junction region)具有特异性。mε链的长同种型在CH4结构域和膜锚定区段之间包含一52个氨基酸的CεmX结构域，该长同种型在表达mIgE的人B淋巴细胞上比不含CεmX结构域的短或常规mε链同种型更为丰富。本发明还涉及这类抗体在治疗IgE介导的过敏性疾病和其它疾病中的应用。

因此，本发明的一方面描述了与膜结合的IgE(mIgE)的表位结合的分离的抗IgE抗体。该表位由第一部分和第二部分组成，第一部分位于mIgE的CH4结构域，例如，TVQRAVSVNP(SEQ ID NO:12)或其片段，第二部分位于mIgE的CεmX结构域，例如，GLAGGSAQSQ(SEQ ID NO:13)或其片段。在某些实施例中，本文所述的抗IgE抗体与SVNPGLAGGSAQS(序列表：第11)结合。