[发明专利]抗PDGF-C抗体

说明书

技术领域

本发明涉及与PDGF-C抗原结合并且能够抑制PDGF-C与PDGFRα受体结合并能够抑制通过PDGF-C的PDGFRα活化的抗体。本发明还公开了此类抗体的应用。所述应用包括癌症的治疗。

背景技术

源自血小板的生长因子C(PDGF-C)在人中是345个氨基酸的蛋白质，其作为323个氨基酸的蛋白质被分泌(Hamada等人2000,FEBS Lett475:97–102；Li&Eriksson 2003,Cytokine Growth Factor Rev 14,91-98)。它是由PDGF-A、-B、-C和–D组成的源自血小板的生长因子家族的成员(Li等人2000,Nat Cell Biol 2:302-309；Bergsten等人2001,Nat Cell Biol3:512-516；La Rochelle等人2001,Nat Cell Biol,3:517-521)。四种PDGF特征性的半胱氨酸结基序是形成同二聚体或异二聚体(PDGF-AA、-AB、-BB、-CC、-DD)的关键(La Rochelle等人2001,Nat Cell Biol 3:517-521；Bergsten等人2001,Nat Cell Biol 3:512-516)。

除保守的半胱氨酸结基序之外，这四种生长因子显示序列同源性。四种PDGF以其单体形式是失活的。在PDGF-C的情况下，它作为潜伏生长因子被分泌，并且N末端CUB结构域的蛋白酶解去除是与其受体结合并活化其受体所需的。虽然存在CUB结构域是生物学活性的一些报道，但普遍的看法是它们作用于使分泌的PDGF-C定位并阻遏其活性(Reigstad等人2005,FEBS J 272:5723-5741)。能够活化PDGF-C的蛋白酶包括纤溶酶和组织纤溶酶原激活物(tPA)(Lei等人2007,Invest Ophthalmol Vis Sci48:2335-2342；Lei 2008,Invest Ophthalmol Vis Sci 49:42-48.)。

PDGF-C经由同二聚体PDGF受体α(PDGFRα)且可能经由异二聚体PDGFRα/β来调节生物过程。该受体的细胞外区域由五个免疫球蛋白样结构域组成，而细胞内部分是酪氨酸激酶结构域。PDGF-CC与其受体的结合加强酪氨酸激酶结构域的活性，并且从而起始细胞内信号传导事件，所述细胞内信号传导事件触发细胞应答例如增殖、迁移、收缩和存活(Li等人2000,Nat Cell Biol 2:302-309)。因此，PDGF-C活化细胞内信号传导事件，所述细胞内信号传导事件接合对于众多生物过程必需的许多细胞应答，所述生物过程是哺乳动物发育和健康所需的。小鼠敲除研究显示PDGF-C是腭发生所需的(Fredriksson等人2004,Cytokine Growth Factors Rev 15:197-204；Reigstad等人2005,J Biol Chem 278:17114-17120)。由于PDGF和PDGFR的过表达在PDGF/PDGFR系统中的异常，例如PDGFR激酶的组成型活化，PDGFR激酶的活化突变，自分泌信号传导，促成许多人类疾病，尤其是恶性肿瘤包括骨肉瘤、肺癌、神经胶质瘤以及恶性星形细胞瘤和成髓细胞瘤(Locker等人2002,Cancer Res 62:3729-3735；Ekman等人1999,Oncogene 18:2481-2488；Zwerner&May 2002,Oncogene21:3847-3854)。PDGF-C是转化细胞因子并且经由几种机制促进肿瘤生长，所述机制包括肿瘤细胞的存活和增殖、用于癌症相关成纤维细胞的趋化现象和肿瘤新生血管形成。已证实PDGF-C在裸鼠中诱导肿瘤，活化锚定依赖性生长，并且是NIH/3T3细胞的有力转化生长因子(Li等人2002,Oncogene 22:1501-1510)。体内肿瘤生成可部分通过PDGFC介导的VEGF表达加以解释，所述PDGFC介导的VEGF表达促进肿瘤血管生成的间接刺激。最后，PDGF-C在对化学疗法抗性的癌症肿瘤中是上调的。在临床前癌症模型中，siRNA介导的PDGF-C水平减少逆转对顺铂的抗性(Yamano等人2010,Int J Cancer 126:437-449)。