[发明专利]L-核酸的酶促合成

权利要求书

1.一种用于添加一个或多个L-核苷酸到第一L-核酸的3'端的方法，其中所述方法包括在具有聚合酶活性的聚合酶存在下使所述一个或多个L-核苷酸与所述第一L-核酸反应的步骤，其中所述聚合酶活性能够添加一个或多个L-核苷酸到所述第一L-核酸的3'端，

其中所述聚合酶由氨基酸序列组成，所述氨基酸序列选自由以下组成的组：根据SEQID NO:1的氨基酸序列、根据SEQ ID NO:2的氨基酸序列、根据SEQ ID NO:3的氨基酸序列、根据SEQ ID NO:4的氨基酸序列、根据SEQ ID NO:15的氨基酸序列、根据SEQ ID NO:16的氨基酸序列、根据SEQ ID NO:17的氨基酸序列、根据SEQ ID NO:18的氨基酸序列、根据SEQ IDNO:19的氨基酸序列、根据SEQ ID NO:20的氨基酸序列、根据SEQ ID NO:21的氨基酸序列和根据SEQ ID NO:22的氨基酸序列，其中所述氨基酸序列的氨基酸是D-氨基酸。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述聚合酶由氨基酸序列组成，所述氨基酸序列选自由以下组成的组：根据SEQ ID NO:15的氨基酸序列、根据SEQ ID NO:16的氨基酸序列、根据SEQ ID NO:17的氨基酸序列、根据SEQ ID NO:18的氨基酸序列、根据SEQ ID NO:19的氨基酸序列、根据SEQ ID NO:20的氨基酸序列、根据SEQ ID NO:21的氨基酸序列和根据SEQID NO:22的氨基酸序列，并且其中所述聚合酶活性是热稳定的聚合酶活性。

3.根据权利要求1所述的方法，其中所述反应步骤是在允许进行所述添加所述至少一个或多个L-核苷酸到所述第一L-核酸的条件下进行。

4.根据权利要求1所述的方法，其中所述添加所述至少一个或多个L-核苷酸到所述第一L-核酸是所述至少一个或多个L-核苷酸共价结合到所述第一L-核酸。

5.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一L-核酸是由DNA、RNA、经修饰的DNA、经修饰的RNA或其组合组成的引物。

6.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一L-核酸由L-核苷酸和任选的修饰组成。

7.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一L-核酸由L-核苷酸组成。

8.根据权利要求1所述的方法，其中所述反应还包含第二L-核酸，其中使一分子的所述第一L-核酸与一分子的所述第二L-核酸杂交。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述聚合酶合成与所述第二L-核酸互补的第三L-核酸，其中所述第三L-核酸包含所述第一L-核酸和添加到所述第一L-核酸的3'端的L-核苷酸。

10.一种用于在L-核苷酸和聚合酶存在下扩增靶L-核酸的方法，其中聚合酶活性能够扩增所述靶L-核酸，其中所述聚合酶由氨基酸序列组成，所述氨基酸序列选自根据以下氨基酸序列组成的组：选自SEQ ID NO:15的氨基酸序列、选自SEQ ID NO:16的氨基酸序列、选自SEQ ID NO:17的氨基酸序列、选自SEQ ID NO:18的氨基酸序列、选自SEQ ID NO:19的氨基酸序列、选自SEQ ID NO:20的氨基酸序列、选自SEQ ID NO:21的氨基酸序列和选自SEQID NO:22的氨基酸序列，其中所述氨基酸序列的氨基酸是D-氨基酸。

11.根据权利要求10所述的方法，其中所述聚合酶活性是热稳定的聚合酶活性。

12.根据权利要求10所述的方法，其中所述反应步骤是在允许扩增所述靶L-核酸的条件下进行。

13.根据权利要求10所述的方法，其中所述方法使用至少一种引物，其中所述至少一种引物由L-核苷酸和任选的修饰组成。