[发明专利]具有改进的转化效率的细菌突变体

权利要求书

1.亲本乳杆菌菌株的一种分离的突变体，其中该乳杆菌菌株选自路氏乳杆菌，该突变体包含对编码I型限制修饰系统的限制性亚基的内源基因的破坏或对编码I型限制修饰系统的特异性亚基的内源基因的破坏，

其中(a)该限制性亚基与SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:16、或其成熟多肽序列具有至少99％、或100％的序列一致性；(b)在高或非常高严谨度条件下，编码该限制性亚基的基因的编码序列与SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:15的全长互补链杂交；或(c)编码该限制性亚基的基因的编码序列与SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:15、或其成熟多肽编码序列具有至少99％、或100％的序列一致性；以及其中(a)该特异性亚基与SEQ ID NO:2、4、6、12、14、或其成熟多肽序列具有至少99％、或100％的序列一致性；(b)在高或非常高严谨度条件下，编码该特异性亚基的基因的编码序列与SEQ ID NO:1、3、5、11、或13的全长互补链杂交；或(c)编码该特异性亚基的基因的编码序列与SEQ ID NO:1、3、5、11、或13、或其成熟多肽编码序列具有至少99％、或100％的序列一致性。

2.如权利要求1所述的分离的突变体，其中该限制性亚基包括SEQ ID NO:8、SEQ IDNO:16、或其成熟多肽序列或由它们组成。

3.如权利要求1所述的分离的突变体，其中该特异性亚基包括SEQ ID NO:2、4、6、12、14、或其成熟多肽序列或由它们组成。

4.如权利要求1所述的分离的突变体，其中破坏发生在编码该I型限制修饰系统亚基的基因的编码序列中。

5.如权利要求1所述的分离的突变体，其中当在相同条件下培养时，与亲本乳杆菌菌株相比，该突变体产生至少25％更少的由破坏的基因编码的I型限制修饰系统亚基。

6.如权利要求1所述的分离的突变体，其中编码该I型限制修饰系统亚基的内源基因被灭活。

7.如权利要求1所述的分离的突变体，该突变体进一步包括对编码一个非I型限制修饰系统蛋白的内源基因的破坏。

8.如权利要求7所述的分离的突变体，其中(a)该非I型限制修饰系统蛋白与SEQ IDNO:20、SEQ ID NO:22、或其成熟多肽序列具有至少99％、或100％的序列一致性；(b)在至少低、中、中-高、高或非常高严谨度条件下，编码该非I型限制修饰系统蛋白的基因的编码序列与SEQ ID NO:19或SEQ ID NO:21的全长互补链杂交；或(c)编码该非I型限制修饰系统蛋白的基因的编码序列与SEQ ID NO:19、SEQ ID NO:21、或其成熟多肽编码序列具有至少99％、或100％的序列一致性。

9.如权利要求8所述的分离的突变体，其中该非I型限制修饰系统蛋白包括SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:22、或其成熟多肽序列或由它们组成。

10.如权利要求8所述的分离的突变体，其中破坏发生在编码该非I型限制修饰系统蛋白的基因的编码序列中。

11.如权利要求8所述的分离的突变体，其中当在相同条件下培养时，与亲本乳杆菌菌株相比，该突变体产生至少25％更少的由破坏的基因编码的非I型限制修饰系统蛋白。

12.如权利要求8所述的分离的突变体，其中编码该非I型限制修饰系统蛋白的内源基因被灭活。

13.如权利要求1所述的分离的突变体，其中当在相同条件下培养时，与亲本乳杆菌菌株相比，该突变体具有改进的转化效率。