[发明专利]向日葵(Helianthus annuus)低棕榈酸含量的分子标记及其使用方法有效
申请号: | 201380026237.0 | 申请日: | 2013-03-15 |
公开(公告)号: | CN104736721B | 公开(公告)日: | 2019-02-01 |
发明(设计)人: | X·胡;M·沙利文-吉尔伯特;J·E·巴克伦;J·T·格迪斯 | 申请(专利权)人: | 陶氏益农公司 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
代理公司: | 北京坤瑞律师事务所 11494 | 代理人: | 吴培善 |
地址: | 美国印*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 向日葵 helianthus annuus 棕榈 含量 分子 标记 及其 使用方法 | ||
1.一种用于鉴定包含低棕榈酸含量的第一向日葵植物或种质的方法,该方法包括:
检测第一向日葵植物或种质中的至少一种与低棕榈酸含量连锁的标记,其中该至少一种标记选自HA0612A,
当检测到至少一个标记扩增子时,鉴定该第一向日葵植物或种质包含低棕榈酸含量;和
将鉴定了低棕榈酸含量的第一向日葵植物或种质与第二向日葵植物或种质杂交,产生包含低棕榈酸含量的向日葵植物或种质后代。
2.根据权利要求1的方法,其中所述检测包括检测多态性简单序列重复标记(SSR)的至少一个等位基因形式。
3.根据权利要求1的方法,其中所述检测包括扩增所述标记或所述标记的一部分而产生经扩增的标记扩增子,和检测所得的经扩增的标记扩增子。
4.根据权利要求3的方法,其中该扩增包括:
将扩增引物或扩增引物对与从所述第一向日葵植物或种质分离的核酸混合,其中该引物或引物对与所述标记的至少一部分互补或部分互补,并能够使用该向日葵核酸作为模板引发DNA聚合酶所致的DNA聚合;和
在包含DNA聚合酶和模板核酸的DNA聚合反应中延长所述引物或引物对,从而产生至少一个扩增子。
5.根据权利要求4的方法,其中所述核酸是DNA分子或RNA分子。
6.根据权利要求3的方法,其中所述扩增包括利用聚合酶链式反应(PCR)或连接酶链式反应(LCR),在PCR或LCR中使用从所述第一向日葵植物或种质分离的核酸作为模板。
7.根据权利要求1的方法,其中所述被检测的标记是用选自下组的软件确定的:TASSELTM,GeneFlowTM,和MapManager-QTXTM。
8.根据权利要求1的方法,其中该方法包括将代表被检测的标记的数据电子传输或电子存储在计算机可读介质内。
9.根据权利要求1的方法,其中该方法包括选择所述第一向日葵植物或种质的后代。
10.一种用于产生具有低棕榈酸含量表型的转基因植物的方法,该方法包括:
将一个或多个外源核酸导入目标植物中从而产生转基因植物,其中该一个或多个外源核酸中的至少一个包含来自向日葵植物的内源核苷酸序列,其在该向日葵植物中与至少一个选择下组的标记连锁:HA0612A,
其中,所得的转基因植物显示降低的棕榈酸含量。
11.根据权利要求10的方法,其中所述目标植物是向日葵植物。
12.根据权利要求10的方法,其中所述来自向日葵植物的内源核苷酸序列在该向日葵植物中与所述至少一个标记连锁,使得该内源核苷酸序列展现与所述至少一个标记的不超过10%的遗传重组频率。
13.根据权利要求10的方法,其中所述核苷酸序列通过定位克隆而被分离,并通过与所述至少一个标记的连锁而被鉴定。
14.根据权利要求10的方法,其中所述外源核酸序列对应于编码多肽的开放阅读框(ORF),所述多肽当在向日葵植物中表达时导致该向日葵植物具有降低的棕榈酸含量。
15.根据权利要求10的方法,其中所述外源核酸包括表达载体。
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