[发明专利]抗‑sPLA2‑IIA抗体及其用途

说明书

技术领域

本发明涉及抗人IIA组分泌型磷脂酶A2(sPLA2-IIA)的新抗体及其在诊断和治疗方法中的用途。

发明背景

分泌型磷脂酶A2(sPLA2)形成结构上相关的、催化磷脂的sn-2脂酰键的水解以释放游离脂肪酸和溶血磷脂的酶家族。通过催化此反应，sPLA2酶在多个生物学过程中起关键作用，所述生物学过程包括细胞膜的稳态、脂质消化、宿主防御、信号转导和脂质介质诸如类花生酸和溶血磷脂衍生物的生成(Valentin等人2000,Bioch.Biophys.Act.59-70；Lambeau,G.,和Gelb,M.H.2008,Annu.Rev.Biochem.77,495-520)。此家族包括11个成员/同工型，它们被命名为sPLA2-IB,sPLA2-IIA,sPLA2-IIC,sPLA2-IID,sPLA2-IIE,sPLA2-IIF,sPLA2-III,sPLA2-V,sPLA2-X,sPLA2-XIIA和sPLA2-XIIB。

已经证明难以在蛋白水平对特定同工型定量，因为酶活性相似且缺少同工型特异性sPLA2抗体。

Nevalainen等人(Biochimica et Biophysica Acta 1733(2005)210-223)开发了一种用于时间分辨荧光免疫分析(TR-FIA)中的抗sPLA2-IIA抗体。此多克隆抗体通过用重组人sPLA2-IIA蛋白免疫兔子获得。TR-FIA的分析灵敏度被记载为1ng/ml。

Cayman chemical提供了一种参考号SCACC353的单克隆抗体。根据该发明人获得的实验结果，SCACC353抗体结合人sPLA2-IIA的Kd为约1nM(参见实施例)。

目前存在着对能够更准确和灵敏地检测生物学样品诸如血清样品中sPLA2-IIA的抗sPLA2-IIA的抗体的需求。

发明内容

本发明由此涉及一种抗人sPLA2-IIA的分离的抗体，其中所述抗体的结合人sPLA2-IIA的Kd小于9.10^-10M。

在本发明的一个实施方案中，重链的可变区包含下面CDR中的至少一种：

VH-CDR1:GYTFTS(SEQ ID NO:1)；

VH-CDR2:WIFPGDGSTE(SEQ ID NO:2)；和

VH-CDR3:WGITAFPLFDY(SEQ ID NO:3),

或具有与所述SEQ ID NO:1-3具有至少60％同一性的氨基酸序列的任何CDR，或轻链的可变区包含下面CDR中的至少一种：

VL-CDR1:RASESVDYDGDSYMN(SEQ ID NO:4)；

VL-CDR2:AASNLES(SEQ ID NO:5)；和

VL-CDR3:LQSNEAPWT(SEQ ID NO:6),

或具有与所述SEQ ID NO:4-6具有至少60％同一性的氨基酸序列的任何CDR。

在本发明的一个实施方案中，重链的可变区包含如上文所定义的CDR中的至少一种，并且轻链的可变区包含如上文所定义的CDR中的至少一种。

在本发明的一个实施方案中，重链的可变区包含下列CDR:GYTFTS(SEQ ID NO:1),WIFPGDGSTE(SEQ ID NO:2)和WGITAFPLFDY(SEQ ID NO:3)，并且轻链的可变区包含下列CDR:RASESVDYDGDSYMN(SEQ ID NO:4),AASNLES(SEQ ID NO:5)和LQSNEAPWT(SEQ ID NO:6)或具有与所述SEQ ID NO:1-6具有至少60％同一性的氨基酸序列的任何CDR。

在本发明的一个实施方案中，编码重链可变区的氨基酸序列是SEQ ID NO:13并且编码轻链可变区的氨基酸序列是SEQ ID NO:14,或具有与所述SEQ ID NO:13-14具有至少60％同一性的氨基酸序列的任何序列。

本发明还涉及包含如上文所述的抗人sPLA2-IIA的抗体的组合物。

本发明还涉及如上文所述的抗人sPLA2-IIA的抗体，其用于治疗sPLA2-IIA相关的病症。

本发明还涉及如上文所述的抗人sPLA2-IIA的抗体，其用于检测生物学样品中的sPLA2-IIA。