[发明专利]用于从生物样品中采集和分离核酸的组合物和方法

权利要求书

1.一种含水组合物，包含：

一种或多种离液剂；

一种或多种洗涤剂；

一种或多种还原剂；

一种或多种螯合剂；

一种或多种缓冲剂，和

一种或多种核酸捕获基质材料，

一起以当疑似包含所选核酸序列的样品与组合物接触时足以变性蛋白质、灭活核酸酶、杀死病原体并且不降解所述样品的酶的量存在。

2.权利要求1的组合物，进一步包括疑似包含微生物或细胞的样品。

3.权利要求1的组合物，其中：a) 一种或多种离液剂以约0.5 M-约6 M的量存在；b) 一种或多种洗涤剂以约0.1%-约1% (wt./vol.)的量存在；c) 一种或多种还原剂以约0.05 M-约0.3 M的量存在；d) 一种或多种螯合剂以约0.01 mM-约1 mM的量存在；e) 一种或多种缓冲剂以约0.0001%-约0.3% (wt./vol.)或约1 mM-约1M的量存在；和(f) 一种或多种NACM材料以每100 μL约1 ng-10 μg的量存在。

4.权利要求3的组合物，其中一种或多种离液剂包括硫氰酸胍、异氰酸胍、盐酸胍或其任何组合。

5.权利要求3的组合物，其中一种或多种洗涤剂包括十二烷基硫酸钠、十二烷基硫酸锂、牛磺脱氧胆酸钠、牛磺胆酸钠、甘胆酸钠、脱氧胆酸钠、胆酸钠、烷基苯磺酸钠、N-月桂酰肌氨酸或其任何组合。

6.权利要求3的组合物，其中一种或多种还原剂包括2-巯基乙醇、三(2-羧乙基)膦、二硫苏糖醇、二甲基亚砜、三(2-羧乙基)膦或其任何组合。

7.权利要求3的组合物，其中a) 一种或多种螯合剂包括乙二醇四乙酸、羟乙基乙二胺三乙酸、二亚乙基三胺五乙酸、N,N-双(羧甲基)甘氨酸、乙二胺四乙酸、无水柠檬酸、柠檬酸钠、柠檬酸钙、柠檬酸铵、柠檬酸氢铵、柠檬酸、柠檬酸二铵、柠檬酸铁铵、柠檬酸锂或其任何组合；或b) 一种或多种表面活性剂包括有机硅聚合物、聚山梨醇酯或其任何组合。

8.权利要求3的组合物，其中一种或多种缓冲剂包括三(羟甲基)氨基甲烷、柠檬酸盐、2-(N-吗啉代)乙磺酸、N,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸、1,3-双(三(羟甲基)甲基氨基)丙烷、4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸、3-(N-吗啉代)丙磺酸、碳酸氢盐、磷酸盐或其任何组合。

9.权利要求3的组合物，其中一种或多种核酸捕获基质材料包括用核酸结合物质包覆的瓷、陶瓷、塑料或玻璃珠。

10.权利要求3的组合物，进一步包括一种或多种短链烷醇。

11.权利要求10的组合物，其中所述一种或多种短链烷醇包括甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、戊醇、己醇或其任何组合，以约1-约25% (vol./vol.)的量存在。

12.权利要求3的组合物，缓冲至pH约6-约7。

13.权利要求3的组合物，进一步包含包括有机硅聚合物或聚山梨醇酯的消泡剂。

14.权利要求1的组合物，进一步包含裸露的RNA、DNA或其组合。

15.权利要求1的组合物，其中：

一种或多种离液剂包括约4 M硫氰酸胍；

一种或多种螯合剂包括约30 mM柠檬酸钠；

一种或多种洗涤剂包括约0.25% (wt./vol.)十二烷基硫酸钠和约0.25% (wt./vol.) N-月桂酰肌氨酸钠盐；

一种或多种还原剂包括约0.1 M 2-巯基乙醇；并进一步包含包括约0.1%有机硅聚合物 (wt./vol.)的消泡剂；和

一种或多种核酸捕获基质材料包括用核酸结合物质包覆的聚合物、瓷、陶瓷、塑料、聚合物或玻璃珠，或其组合。

16.权利要求15的方法，其中样品包含与组合物接触后被物理裂解的一种或多种病毒、细菌、真菌、动物或植物细胞。