[发明专利]制造电泳盒的方法

说明书

技术领域

本发明涉及制造用于电泳实验的电泳凝胶盒的方法，并且更特别地，涉及制造这样的盒的高效方法。

背景技术

电泳是常用于分析的方法，其中，带电荷的分子和微粒在分离介质(通常是凝胶)中迁移，分离介质在两个电极之间经受电场。可用等电点(pI)、分子量、电荷或这些因素的组合来使蛋白质分离。

分离凝胶通常置于支承件上，并且凝胶的两个相对的端部接触呈溶液形式或刚性形式的电极缓冲剂。电极可插入包含电极缓冲剂的容器中。来自电解介质和离子储存器的缓冲溶液使pH值和其它参数保持恒定。在分离之后，用不同的方式检测和识别分子：例如通过对凝胶着色直观地检测和识别，或者用光学手段，诸如用激光扫描仪等扫描经着色的凝胶或带标记样本，或者对它们成像。

凝胶电泳如今在常规上用来分离生物分子，诸如蛋白质、缩氨酸、核酸等。在不同类型的筛选、识别(细胞信号转导、表达&净化)或临床试验中操作样本。蛋白质样本可源自例如人体、哺乳动物组织、细胞溶菌或细菌、昆虫或酵母细胞系统。不同类型的分子的电泳条件是不同的，而且必须适应许多情况。因而，通常必须针对各个类型的样本来选择凝胶和缓冲溶液两者。

电泳过程的准备包括几个非常费力的步骤。选择适当的凝胶，并且将其置于或模制在支承件上。凝胶与缓冲溶液接触。常用方式是使玻璃盒或塑料盒中的凝胶厚片接触缓冲剂罐中的缓冲溶液。对于各次运行，凝胶必须置于支承件或准备好的盒上。然后对缓冲剂罐填充缓冲溶液，并且将样本施用到凝胶上。为了避免对缓冲剂罐中的缓冲溶液的操作，已经在WO 87/04948中提议，在凝胶材料中结合缓冲剂物质，由此获得呈缓冲剂条的形式的缓冲剂。另外，US 6368481公开了一种预浇铸电泳盒，其中，结合缓冲剂条作为盒的组成部分。

在电泳分离之后，以及为了检测给定样本中的特定蛋白质，可将蛋白质转移到膜片(典型地硝化纤维或PVDF)，其中使用对目标蛋白质专有的抗体来探测(检测)它们，这是通常被称为蛋白质印迹或免疫印迹的过程。将蛋白质转移到膜片的主要方法被称为电印迹，并且使用电流来将蛋白质从凝胶拉到膜片中。蛋白质从凝胶内移动到膜片上，同时保持它们在凝胶内所具有的组织结构，由此蛋白质暴露在薄表层上供检测。蛋白质由于膜片的非专有的蛋白质结合属性(即，同样良好地结合所有蛋白质)而结合到膜片的表面上。为了避免不明确地结合探测抗体，可挡住膜片上的其余结合位点。

在探测(检测)过程期间，膜片与转移蛋白质一起被针对关注的蛋白质的特定的第一抗体和例如关注的蛋白质的第二抗体(其具有与报告酶关联的经改性的抗体)孵化；当暴露于合适的基底时，这个酶驱动比色反应，并且产生颜色或带荧光标记的目标(染料)，这可由适当的成像技术检测。

电泳和接下来的印迹步骤在传统上的特征在于对凝胶和膜片，以及一系列液体(例如缓冲剂、试剂、洗液等)进行许多人工操作。在过去作出了许多尝试来促进工作流以及/或者使工作流自动化，但这样的工作很少成功。

US 5674006公开了用于使流体高效地循环和移动穿过工件的设备的一个示例。该设备可对使用的流体提供自动化操作，而且很适合用来对诸如电泳凝胶的生物试样进行着色和固定。

发明内容

本发明的目标是提供一种制造电泳凝胶盒的新型方法，该方法克服了现有技术中的一个或多个缺点。这由独立权利要求中限定的方法实现。进一步提供一种电泳盒。

该制造方法的一个优点于，它提供改进的盒属性，同时通过减少过程步骤来简化制造过程。

根据一个实施例，提供一种制造电泳凝胶盒的方法，电泳凝胶盒具有盒壳体，盒壳体限定用于模制凝胶部件的凝胶隔室，该方法包括以下步骤：

以刚性材料模制盒壳体部件，盒壳体部件具有外部面、限定凝胶隔室的至少一部分的内部面，以及用于允许从外部面接近凝胶隔室的至少一个开口，以及

模制封闭部件，封闭部件形成为在外部面处封闭盒壳体部件的至少一个开口，

其中，在盒壳体部件部分地用作模具的情况下模制封闭部件，并且封闭部件由弹性材料构成，弹性材料非永久性地粘合到刚性材料上，以使得可选择性地移除封闭部件。

根据一个实施例，封闭部件至少部分地延伸到至少一个开口中。

根据一个实施例，封闭部件形成为与盒壳体部件的内部面齐平。

根据一个实施例，封闭部件形成为延伸超过盒壳体部件的内部面，至少部分地进入到凝胶隔室中。

根据一个实施例，至少一个开口是样本加载井。