[发明专利]琥珀酰亚胺活化型硝酰化合物及其用于蛋白质硝酰化的使用方法

权利要求书

1.一种具有结构(VI)的硝酰化蛋白质：

其中

Z表示所述蛋白质；

R₁、R₂、R₃和R₄的每一个独立地为C₁-C₄烷基；

X为氧；

Y为CH₂；

m为0或1；

p为与所述蛋白质偶联的硝酰基的平均数，其中p为1至25；

N为所述蛋白质的氮；且

所述的蛋白质为血红蛋白四聚体。

2.一种制备权利要求1的硝酰化蛋白质的方法，包括使所述蛋白质与式(II)的硝酰化剂反应

其中

R₁、R₂、R₃和R₄的每一个独立地为C₁-C₄烷基；

X为氧；

Y为CH₂；

m为0或1；且

所述的蛋白质为血红蛋白四聚体。

3.根据权利要求1所述的硝酰化蛋白质，其中R₁、R₂、R₃和R₄的每一个均为-CH₃。

4.根据权利要求2所述的方法，其中R₁、R₂、R₃和R₄的每一个均为-CH₃。

5.根据权利要求1或3所述的硝酰化蛋白质，其中m为0。

6.根据权利要求1或3所述的硝酰化蛋白质，其中m为1。

7.根据权利要求2所述的方法，其中m为0。

8.根据权利要求2所述的方法，其中m为1。

9.根据权利要求1或3所述的硝酰化蛋白质，其中所述蛋白质的N端氨基经硝酰化。

10.根据权利要求1或3所述的硝酰化蛋白质，其中赖氨酸残基的至少一个E(ε)-氨基经硝酰化。

11.根据权利要求1或3所述的硝酰化蛋白质，其中p为至少2。

12.根据权利要求11所述的硝酰化蛋白质，其中p为至少10。

13.根据权利要求1或3所述的硝酰化蛋白质，其中p为15至20。

14.根据权利要求1所述的硝酰化蛋白质，其中所述血红蛋白四聚体包含人血红蛋白α-亚基和β-亚基。

15.根据权利要求1所述的硝酰化蛋白质，其中所述血红蛋白四聚体包含交联αα二聚体或交联ββ二聚体。

16.根据权利要求14所述的硝酰化蛋白质，其中所述人血红蛋白α-亚基在N端缬氨酸残基的α-氨基处经硝酰化。

17.根据权利要求14所述的硝酰化蛋白质，其中所述人血红蛋白α-亚基在选自由赖氨酸-7、赖氨酸-11、赖氨酸-16、赖氨酸-40、赖氨酸-56、赖氨酸-60、赖氨酸-61、赖氨酸-90、赖氨酸-99、赖氨酸-127、赖氨酸-139及其组合组成的组的赖氨酸残基的ε-氨基处经硝酰化。

18.根据权利要求14所述的硝酰化蛋白质，其中所述人血红蛋白β-亚基在N端缬氨酸残基的α-氨基处经硝酰化。