[发明专利]通过RNA原位杂交检测免疫球蛋白轻链限制性

权利要求书

1.用于检测B细胞中免疫球蛋白轻链限制性和克隆性的方法，所述方法包括：

(a)从受试者获得B细胞样品；

(b)利用(i)设计为特异性杂交至免疫球蛋白κ链恒定区(IGKCR)RNA的至少一种探针组；和(ii)设计为特异性杂交至免疫球蛋白λ链恒定区(IGLCR)RNA的至少一种探针组对所述样品进行双重原位杂交测定；

(c)检测所述样品中B细胞群体中与杂交的IGKCR探针有关的信号和与杂交的IGLCR探针有关的信号；和

(d)确定所述B细胞群体中单个细胞内与杂交的IGKCR探针和杂交的IGLCR探针有关的信号模式，其中单个细胞中的信号模式表明存在或不存在所述B细胞的轻链限制性和克隆性。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，仅有与杂交的IGKCR探针有关的信号的个体B细胞中的模式表明样品中的κ限制性。

3.根据权利要求1所述的方法，其中，仅有与杂交的IGLCR探针有关的信号的个体B细胞中的模式表明样品中的λ限制性。

4.根据权利要求1所述的方法，其中，相同B细胞中与杂交的IGKCR探针有关的信号和与杂交的IGLCR探针有关的信号两者的模式表明所述样品是单克隆的。

5.根据权利要求1所述的方法，其中，所述群体内单独B细胞中与杂交的IGKCR探针有关的信号和与杂交的IGLCR探针有关的信号两者的模式表明所述样品是多克隆的。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其中，所述受试者是人。

7.用于检测B细胞中免疫球蛋白轻链限制性和克隆性的方法，所述方法包括：

(a)从受试者获得B细胞样品；

(b)利用(i)设计为特异性杂交至免疫球蛋白κ链恒定区(IGKCR)RNA的至少一种探针组；(ii)设计为特异性杂交至免疫球蛋白λ链恒定区(IGLCR)RNA的至少一种探针组；和(iii)设计为特异性杂交至免疫球蛋白λ样多肽5(IGLL5)RNA的至少一种探针组对所述样品进行一种或多种原位杂交测定；

(c)检测所述样品中B细胞群体中与杂交的IGKCR探针有关的信号，与杂交的IGLCR探针有关的信号、和与杂交的IGLL5探针有关的信号；和

(d)确定所述B细胞群体中单个细胞内与杂交的IGKCR探针、杂交的IGLCR探针和杂交的IGLL5探针有关的信号的模式，其中所述单个细胞中的信号模式表明存在或不存在所述B细胞的轻链限制性和克隆性。

8.根据权利要求7所述的方法，其中，作为单重反应在连续切片上进行一个或多个原位杂交测定。

9.根据权利要求7所述的方法，其中，所述IGKCR探针组和IGLCR探针组在相同原位杂交测定中杂交。

10.根据权利要求9所述的方法，其中，IGLL5探针组的杂交是处于其中IGKCR探针组和IGLCR探针组被杂交的测定中的单独原位杂交测定中。

11.根据权利要求7-10中任一项所述的方法，还包括使用至少一种阴性对照探针组。

12.根据权利要求7-11中任一项所述的方法，其中，仅具有与杂交的IGKCR探针有关的信号的个体B细胞中的模式表明所述样品中的κ限制性。

13.根据权利要求7-11中任一项所述的方法，其中，仅具有与杂交的IGLCR探针有关的信号的个体B细胞中的模式表明所述样品中的λ限制性。

14.根据权利要求7-11中任一项所述的方法，其中，单独的B细胞中与杂交的IGKCR探针有关的信号和与杂交的IGLCR探针有关的信号两者的模式表明所述样品是多克隆的。

15.根据权利要求7-11中任一项所述的方法，其中，相同B细胞中与杂交的IGKCR探针有关的信号和与杂交的IGLCR探针有关的信号两者的模式表明所述样品是单克隆的。

16.根据权利要求7-11中任一项所述的方法，其中，在相同B细胞中存在与IGKCR探针有关的信号和与IGLCR探针有关的信号两者，并且其中与杂交的IGLL5探针有关的信号水平大于或等于与杂交的IGLCR探针有关的信号水平的模式表明了κ限制性。