[发明专利]癌的检测方法及识别胰脏特异性的核糖核酸酶1的抗体

说明书

制备在胰脏特异性的RNase 1的能够进行N型糖链修饰的部位没有结合糖链的情况下与该部位结合、在结合有N型糖链的情况下与该部位的结合被阻碍的单克隆抗体；另外，制备能够与该抗体同时地与相同胰脏特异性的RNase 1结合的单克隆抗体，使用它们，求出A与B的比，由此检测胰腺癌。A＝胰脏特异性的RNase 1的能够进行N型糖链修饰的部位的、结合有N型糖链的部位或没有结合N型糖链的部位的量。B＝胰脏特异性的RNase 1的能够进行N型糖链修饰的部位的量。

技术领域

本发明涉及癌的检测方法及识别胰脏特异性的核糖核酸酶1的抗体。更详细而言涉及，通过测定糖蛋白的能够进行N型糖链修饰的部位是否结合糖链而进行癌的检测的方法。

背景技术

作为诊断初期阶段的癌的检测方法，优选将非侵入的来源于生物的试样例如血液、尿等比较容易采集的体液作为被检体。作为现在的胰腺癌的诊断时所使用的血清标记物，有：CA19-9、DUPAN-2等。然而，存在如下缺点：这些标记物的脏器特异性低、从遗传的理由出发有该标记物不反应的情况等、不能成为决定性的确定诊断。

作为核糖核酸酶家族之一的胰脏特异性的核糖核酸酶1(以下，将核糖核酸酶1称为“RNase 1”)为胰脏特异性地表达、并且被分泌至细胞外的体液中的糖蛋白。该蛋白质是被翻译成包含156个氨基酸的肽(序列号1)，在分泌信号的去除、接受糖链修饰之后，成为具有128个氨基酸的肽序列(序列号2)的成熟糖蛋白，从而被分泌至细胞外。能够进行N型糖链修饰的部位、即有可能接受N型糖链修饰的氨基酸残基为序列号2中的第34位、第76位、第88位的天冬酰胺残基。

一直以来都在研究胰脏特异性的RNase 1，虽然报告了癌的表达、活性的变化等，但没有实际临床应用的例子。1980年Doran等人报告了胰腺癌患者血清中的核糖核酸酶活性增加(非专利文献1)，只有活性的记载，对于核糖核酸酶的分子种类没有限定。关于胰脏特异性的RNase 1的糖链修饰，1994年报告了由健康人得到的核糖核酸酶，对于3处能够进行糖链修饰的部位的各自的糖链附加的程度有所报告，但是对于与胰腺癌的关联性没有报告(非专利文献2)。2000年，Fernandez-Salas等人报告了由源自胰腺癌的培养细胞分泌的胰脏特异性的RNase 1的分子量大于由正常的胰脏得到的RNase 1的分子量，作为其理由之一，指出了糖链修饰量的增加(非专利文献3)。进而，同一研究组在2003年和2007年，发表了关于胰脏特异性的RNase 1的糖链修饰的报告，其中指出了由胰腺癌(Pancreatic cancer)患者的血清得到的胰脏特异性的RNase 1的N型糖链结构有变化，特别是明确了被核心岩藻糖化的2条支链复合型糖链增加，胰脏特异性的RNase 1的分子量增加起因于附加的糖链结构自身的分子量增加(非专利文献4、5)。然而，至今并没有将糖蛋白的能够进行N型糖链修饰的部位的有无结合糖链与癌关联的报告。

现有技术文献

非专利文献

非专利文献1：J.Clin.Pathol.33，1212-13(1980)

非专利文献2：Biol.Chem.Hoppe Seyler 375，357-63(1994)

非专利文献3：Eur J Biochem.267，1484-1494(2000)

非专利文献4：Glycobiology 13，227-244(2003)

非专利文献5：Glycobiology 17，388-400(2007)

发明内容

发明要解决的问题

本发明着眼于糖蛋白的能够进行N型糖链修饰的部位，目的在于提供癌的检测方法和识别胰脏特异性的RNase 1的抗体。

用于解决问题的方案