[发明专利]用于产生免疫球蛋白样分子的方法和手段

权利要求书

1.一种用于从单个宿主细胞产生至少两种不同的免疫球蛋白样分子的方法，其中所述两种免疫球蛋白样分子各自包含能够形成界面的两个CH3结构域，所述方法包括在所述细胞中提供：

a.编码第一含CH3结构域之多肽链的第一核酸分子，

b.编码第二含CH3结构域之多肽链的第二核酸分子，

c.编码第三含CH3结构域之多肽链的第三核酸分子，和

d.编码第四含CH3结构域之多肽链的第四核酸分子，

其中，所述第一含CH3结构域之多肽链在366位氨基酸处包含赖氨酸(K)残基并且在351位氨基酸处包含赖氨酸(K)残基；并且其中所述第二含CH3结构域之多肽链在351位氨基酸处包含天冬氨酸(D)残基并且在368位氨基酸处包含谷氨酸(E)残基；并且其中所述第三含CH3结构域之多肽链在356位氨基酸处包含赖氨酸(K)残基并且在399位氨基酸处包含赖氨酸(K)残基；并且其中所述第四含CH3结构域之多肽链在392位氨基酸处包含天冬氨酸(D)残基并且在409位氨基酸处包含天冬氨酸(D)残基，所述方法还包括培养所述宿主细胞并且使所述至少四种核酸分子能够表达以及从培养物中收获所述至少两种不同的免疫球蛋白样分子的步骤。

2.权利要求1所述的方法，其还包括为所述宿主细胞提供编码共同轻链的核酸分子。

3.权利要求1所述的方法，其中所述含CH3结构域之多肽链各自还包含识别靶表位的可变区。

4.权利要求3所述的方法，其中4个所述含CH3结构域之多肽链的4个可变区各自识别不同的靶表位。

5.权利要求3所述的方法，其中所述第一含CH3结构域之多肽链的可变区和所述第二含CH3结构域之多肽链的可变区识别不同的靶表位，而所述第三含CH3结构域之多肽链的可变区和所述第四含CH3结构域之多肽链的可变区识别相同的靶表位。

6.权利要求5所述的方法，其中所述第三含CH3结构域之多肽链的可变区和所述第四含CH3结构域之多肽链的可变区识别的靶表位与所述第一含CH3结构域之多肽链的可变区或所述第二含CH3结构域之多肽链的可变区识别的靶表位相同。

7.权利要求5所述的方法，其中所述第三含CH3结构域之多肽链的可变区和所述第四含CH3结构域之多肽链的可变区识别的靶表位与所述第一含CH3结构域之多肽链的可变区或所述第二含CH3结构域之多肽链的可变区识别的靶表位不同。

8.权利要求3所述的方法，其中所述第一含CH3结构域之多肽链的可变区和所述第二含CH3结构域之多肽链的可变区识别相同的靶表位，而所述第三含CH3结构域之多肽链的可变区和所述第四含CH3结构域之多肽链的可变区识别不同于所述第一可变区和所述第二可变区识别之靶表位的第二靶表位。

9.权利要求3所述的方法，其中所述靶表位位于相同的靶分子上。

10.权利要求9所述的方法，其中所述靶分子是可溶性分子。

11.权利要求9所述的方法，其中所述靶分子是膜结合分子。

12.权利要求3所述的方法，其中所述靶表位位于不同的靶分子上。

13.权利要求12所述的方法，其中所述不同的靶分子在相同细胞上表达。

14.权利要求12所述的方法，其中所述不同的靶分子在不同细胞上表达。

15.权利要求12所述的方法，其中所述不同的靶分子是可溶性分子。

16.权利要求12所述的方法，其中一种靶分子是可溶性分子，而第二种靶分子是膜结合分子。

17.根据权利要求1所述的方法，其中所述至少两种不同的免疫球蛋白样分子是抗体。

18.权利要求3至8、12至14或16中任一项所述的方法，其中至少一种所述靶表位位于肿瘤细胞上。

19.权利要求3至8、12至14或16中任一项所述的方法，其中至少一种所述靶表位位于效应细胞上。

20.权利要求19所述的方法，其中所述效应细胞是NK细胞、T细胞、B细胞、单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞或嗜中性粒细胞。