[发明专利]用于多肽生产的细胞培养组合物和方法

权利要求书

1.培养细胞的方法,包括步骤：使细胞与细胞培养基接触，所述细胞培养基包含:

从大约200mg/L至大约1200mg/L胱氨酸；

从大约0.05mg/L至大约1.0mg/L维生素B2；

从大约0.05mg/L至大约10.0mg/L维生素B6；

从大约0.05mg/L至大约12.0mg/L维生素B9；和

从大约0.05mg/L至大约2.5mg/L维生素B12。

2.权利要求1的方法,包括步骤：使细胞与细胞培养基接触，所述细胞培养基包含:

从大约0.7mM至大约2.5mM胱氨酸；

从大约0.11μM至大约0.72μM维生素B2；

从大约4.5μM至大约30.0μM维生素B6；

从大约3.4μM至大约22.0μM维生素B9；和

从大约0.2μM至大约1.5μM维生素B12。

3.权利要求1或2的方法,其中细胞培养基还包含维生素B1,维生素B3,维生素B5和维生素B7中的任一或多种。

4.权利要求3的方法,其中细胞培养基还包含以下之任一或多种:

从大约2.0μM至大约14.0μM维生素B1；

从大约11.0μM至大约72.0μM维生素B3；

从大约6.8μM至大约44.0μM维生素B5；和

从大约0.02μM至大约0.14μM维生素B7。

5.权利要求1-4之任一的方法,其中细胞培养基还包含铁源。

6.权利要求5的方法,其中铁源是柠檬酸铁或硫酸亚铁。

7.权利要求1-6之任一的方法,其中细胞培养基包含从大约2μM至大约80μM浓度的柠檬酸铁。

8.权利要求1-7之任一的方法,其中细胞培养基包含从大约11.0μM至大约36.0μM浓度的柠檬酸铁。

9.权利要求1-8之任一的方法,其中细胞培养基还包含氢化可的松。

10.权利要求9的方法,其中氢化可的松在细胞培养基中的浓度为从大约0.05μM至大约0.25μM。

11.权利要求1-10之任一的方法,其中细胞培养基是化学确定的细胞培养基。

12.权利要求1-10之任一的方法,其中细胞培养基是化学不确定的细胞培养基。

13.权利要求1-12之任一的方法,其中使细胞在细胞生长阶段与所述细胞培养基接触。

14.权利要求1-13之任一的方法,其中使细胞在细胞生产阶段与所述细胞培养基接触。

15.权利要求14的方法,其中所述方法还包括步骤：向细胞培养基添加半胱氨酸。

16.权利要求15的方法,其中半胱氨酸以在细胞培养基中提供从大约80mg/L至大约1500mg/L半胱氨酸的量添加。

17.权利要求15的方法,其中半胱氨酸以在细胞培养基中提供大约1500mg/L半胱氨酸的量添加。

18.权利要求15的方法,其中半胱氨酸以在细胞培养基中提供大约140mg/L半胱氨酸的量添加。

19.生产多肽的方法，包括步骤：在细胞培养基中培养包含编码多肽的分离核酸的细胞，其中:

(a)细胞培养基包含:

从大约200mg/L至大约1200mg/L胱氨酸；

从大约0.05mg/L至大约1.0mg/L维生素B2；

从大约0.05mg/L至大约10.0mg/L维生素B6；

从大约0.05mg/L至大约12.0mg/L维生素B9；

从大约0.05mg/L至大约2.5mg/L维生素B12；和

(b)细胞表达多肽。

20.权利要求19的方法,其中细胞培养基包含:

从大约0.7mM至大约2.5mM胱氨酸；

从大约0.11μM至大约0.72μM维生素B2；

从大约4.5μM至大约30.0μM维生素B6；

从大约3.4μM至大约22.0μM维生素B9；和

从大约0.2μM至大约1.5μM维生素B12。