[发明专利]用于苯乙烯合成的酶和方法

权利要求书

1.一种包含重组表达的肉桂酸脱羧酶的宿主细胞，其中重组表达的肉桂酸脱羧酶是氨基酸序列示于SEQ ID NO：8的肉桂酸脱羧酶的突变体，所述突变体选自为对应于SEQ IDNO：8第175、190或193位的氨基酸残基突变，其中对应于SEQ ID NO：8的第175位的氨基酸残基位置的突变是异亮氨酸，对应于第193位的氨基酸残基位置的突变是脯氨酸，对应于第190位的氨基酸残基位置的突变选自：谷氨酸，半胱氨酸，天冬氨酸，缬氨酸，天冬酰胺，亮氨酸，组氨酸，脯氨酸和丝氨酸。

2.一种生产苯乙烯的方法，所述方法包括：

（a）使权利要求1的宿主细胞与可发酵碳底物接触；以及

（b）在培养基中培养所述宿主细胞足够时间以产生苯乙烯。

3.权利要求1的宿主细胞，其中重组表达的肉桂酸脱羧酶是重组表达的融合蛋白的部分，所述重组表达的融合蛋白包含含有苯丙氨酸解氨酶的第一域和含有所述肉桂酸脱羧酶的第二域，所述宿主细胞进一步包含膜结合转运蛋白。

4.权利要求3的宿主细胞，其中膜结合转运蛋白为一种细菌ABC转运体。

5.根据权利要求2所述的方法，还包括通过吸收材料吸收所述苯乙烯产物的蒸汽。

6.一种生产苯乙烯的方法，所述方法包括：

（a）使根据权利要求3所述的宿主细胞与可发酵碳底物接触；以及

（b）在培养基中培养所述细胞足够时间以产生苯乙烯。

7.根据权利要求5所述的方法，其中，所述吸收材料选自下组：聚合物树脂、活性炭、纤维素材料、以及它们的组合。

8.根据权利要求7所述的方法，其中，所述聚合物树脂是一种疏水树脂。

9.根据权利要求7所述的方法，其中，所述聚合物树脂选自下组：C18、C8、SDB-L吸附剂树脂、以及它们的组合。

10.根据权利要求3所述的宿主细胞，其中，所述融合蛋白进一步包括共价连接所述第一域和所述第二域的连接体。

11.根据权利要求10所述的宿主细胞，其中，所述连接体是一种包含2-15个氨基酸的肽连接体。

12.根据权利要求1所述的宿主细胞，其中，所述肉桂酸脱羧酶由SEQ ID NO:16，SEQ IDNO: 18, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 26, SEQ IDNO: 28, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 36或SEQ IDNO: 38所示的序列组成。