[发明专利]得到单核细胞或NK细胞的方法有效
申请号: | 201380034962.2 | 申请日: | 2013-07-10 |
公开(公告)号: | CN104395461B | 公开(公告)日: | 2020-06-16 |
发明(设计)人: | 阿部博幸;川崎广明 | 申请(专利权)人: | 阿部博幸;川崎广明 |
主分类号: | C12N5/0783 | 分类号: | C12N5/0783;C12N5/0784 |
代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 11038 | 代理人: | 罗菊华 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 得到 单核 细胞 nk 方法 | ||
本发明涉及从末梢血分离可用于免疫细胞疗法的细胞,并使其增殖的方法。本发明可提供免疫细胞疗法中可利用的充分的数的免疫系统细胞。
【技术领域】
本发明涉及从末梢血分离可用于免疫细胞疗法的细胞,并使其增殖的方法,更具体涉及从末梢血分离单核细胞或NK细胞,并使其增殖的方法。
【背景技术】
近年在多个医疗机关实施作为免疫细胞疗法的NK疗法及单核细胞来源的树突细胞疗法。利用获得性免疫的树突细胞疗法及利用自然免疫的NK疗法由其益处而作为组合疗法适用的情况多。
至今,上述组合疗法的情况中,树突细胞及NK细胞从独立的血液得到。之后分化为树突细胞的单核细胞由成分输血(成分采血)进行成分采集。另一方面,NK细胞从末梢血采集,并增殖。从而,在上述组合疗法中一般需要2次采血。
【现有技术文献】
【非专利文献】
非专利文献1:Castiello et al.,Cancer Immunol.Immunother.,60:457-466,2011。
非专利文献2:Zamai et al.,J.Immunol.,178:4011-4016,2007。
【发明内容】
【发明要解决的技术课题】
但是,由于仅一方面的采血(特别是成分输血)也给患者带来负担,如果进行两方的采血,对患者的身体的负担会再增大。从而,在免疫细胞疗法中需求对患者负担少的,用于得到单核细胞及NK细胞的其他方法。
从而,鉴于这样的课题,本发明的目的是减轻患者的负担的同时,提供免疫细胞疗法中利用可能的充分的数的免疫系细胞。
【解决课题的技术方案】
为了解决上述课题,本发明中涉及的方法是得到单核细胞或NK细胞的方法,其包括:
从末梢血,使用对于单核细胞的表面标志物特异性的抗体分离单核细胞,由此回收单核细胞样品的工序,
将分离单核细胞之后的细胞集团作为NK细胞样品回收的工序,以及
培养上述单核细胞样品或NK细胞样品,使单核细胞或NK细胞增殖的工序。
【发明效果】
由本发明可减轻患者的负担的同时,提供免疫细胞疗法中利用可能的充分的数的免疫系细胞。
【附图说明】
【图1】是显示确认单核细胞从末梢血选择性地分离的FACS解析的结果的图。
【图2】是显示确认选择性地分离单核细胞之后的样品中含NK细胞的FACS解析的结果的图。
【图3】是显示从根据本发明中涉及的培养方法及以往的培养方法增殖的单核细胞、及所述单核细胞分化的树突细胞的细胞数的经时的变化的图。
【图4】是显示根据本发明中涉及的培养方法及以往的培养方法增殖的NK细胞的细胞数的经时的变化的图。
【图5】是显示确认单核细胞增殖(第3天)的FACS解析的结果的图。
【图6】是显示确认树突细胞增殖的FACS解析的结果的图。
【图7】是显示确认NK细胞增殖的FACS解析的结果的图。
【实施方式】
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