[发明专利]干细胞微粒有效
申请号: | 201380038368.0 | 申请日: | 2013-07-18 |
公开(公告)号: | CN104703609B | 公开(公告)日: | 2019-02-19 |
发明(设计)人: | 约翰·辛登;拉腊·斯泰瓦纳托;伦道夫·考特林 | 申请(专利权)人: | 兰诺龙有限公司 |
主分类号: | A61K31/711 | 分类号: | A61K31/711;C12N5/0797;A61P25/28;A61P11/00;A61P9/00;A61K35/30 |
代理公司: | 上海弼兴律师事务所 31283 | 代理人: | 薛琦 |
地址: | 英国*** | 国省代码: | 英国;GB |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 干细胞 微粒 | ||
1.一种从部分分化的细胞制备干细胞微粒的体外方法,其包括以下步骤:
(i)在允许干细胞分化的环境中培养干细胞;
(ii)收集所述部分分化的细胞产生的微粒;
其中所述的部分分化的细胞是神经干细胞,所述神经干细胞表达标记物Nestin、Sox2、GFAP、βIII-微管蛋白、DCX、GALC、TUBB3、GDNF和IDO中的一种或多种;和/或,其中所述微粒是外来体且所述外来体表达DCX、GFAP、GALC、TUBB3、GDNF和IDO中的一种或多种。
2.根据权利要求1所述的方法,其中所述允许干细胞分化的环境是在多隔室生物反应器中培养。
3.根据权利要求2所述的方法,其中所述多隔室生物反应器含有被一个或多个膜或隔层分隔的至少两个隔室,所述膜或隔层将含有细胞的隔室与一个或多个含有气体和/或培养基的隔室分隔开。
4.根据权利要求2所述的方法,其中所述培养超过7天。
5.根据权利要求1~4任一项所述的方法,其还包括从干细胞条件培养基中分离微粒。
6.根据权利要求5所述的方法,其中所述干细胞条件培养基包含刺激干细胞将微粒释放到培养基中的一种或多种添加剂组分或药剂。
7.根据权利要求6所述的方法,其中所述一种或多种添加剂组分选自转化生长因子-β(TGF-β)、干扰素-γ(INF-γ)和/或肿瘤坏死因子-α(TNF-α)。
8.根据权利要求5所述的方法,其中所述干细胞在低氧条件下培养。
9.根据权利要求5所述的方法,其中所述干细胞与不同类型细胞共培养。
10.根据权利要求9所述的方法,其中所述不同类型细胞是内皮细胞。
11.根据权利要求1~4任一项所述的方法,其中所述干细胞是神经干细胞。
12.根据权利要求11所述的方法,其中所述干细胞为神经干细胞系。
13.根据权利要求12所述的方法,其中所述神经干细胞系是条件永生化的。
14.根据权利要求12所述的方法,其中所述神经干细胞系是具有ECACC登记No.04091601的CTX0E03;或具有ECACC登记No.04110301的STR0C05;或具有ECACC登记No.04092302的HPC0A07。
15.根据权利要求12所述的方法,其中所述神经干细胞系生长于无血清培养基中。
16.根据权利要求1~4任一项所述的方法,其中所述微粒中至少有两、三、四、五、六或七种miRNA与在标准T-175烧瓶中培养的相应干细胞中相比被上调或下调;所述上调或下调通过倍数调节所计算。
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