[发明专利]基因治疗载体的广泛的基因递送

权利要求书

1.一种在哺乳动物中表达治疗基因的方法，所述方法包括向所述哺乳动物的脑脊液和血液联合施用包含所述基因的可转移的病毒载体。

2.一种治疗哺乳动物中的多系统疾病的方法，所述治疗通过施用有效地治疗所述疾病的治疗基因来实现，其中所述治疗基因被包含在可转移的病毒载体中，并且其中所述方法包括向所述哺乳动物的脑脊液和血液联合施用所述载体。

3.权利要求1或2的方法，其中所述可转移的病毒载体是可转移的AAV(tAAV)载体。

4.权利要求3的方法，其中所述tAAV载体选自AAV4载体、AAV7载体、AAV9载体、AAV10载体、或牛AAV载体。

5.权利要求1～4任一项的方法，其中所述tAAV载体的基因组是单链的或双链的。

6.权利要求1～5任一项的方法，其中所述tAAV载体包含缺少功能性Rep和Cap编码病毒序列的复制缺陷型AAV基因组。

7.权利要求1～6任一项的方法，其中所述tAAV载体是ssAAV9载体、scAAV9载体、或AAV10载体。

8.权利要求1或2的方法，其中通过i.c.v.注射(ICV)、鞘内注射、或小脑延髓池内注射来将可转移的病毒载体施用到所述哺乳动物的脑脊液(CSF)中。

9.权利要求8的方法，其包括将载体至少施用到一个脑侧室中。

10.权利要求1或2的方法，其中通过静脉内注射(IV)、肌内注射、动脉内注射、腹膜内注射、或皮下注射来将可转移的病毒载体施用到所述哺乳动物的血液中。

11.权利要求10的方法，其包括载体的静脉内注射。

12.权利要求1或2的方法，其包括载体的ICV和IV联合注射。

13.权利要求1或2的方法，其中所述联合施用包括在彼此相隔小于72小时内、优选小于48小时内、更优选小于24小时内、还更优选彼此相隔小于1小时内施用到所述哺乳动物的CSF和血液中。

14.权利要求12的方法，其中所述联合施用是基本上同时的注射。

15.权利要求1或2的方法，其中比率：被施用到CSF中的剂量/被施用到血液中的剂量介于0.2和5之间，优选地介于0.2和1.5之间。

16.权利要求13的方法，其中所述比率为0.4、0.6、0.8、1.0、或1.25。

17.前述权利要求任一项的方法，其中所述治疗基因编码治疗性RNA或治疗性蛋白，所述治疗性蛋白选自生长因子、细胞因子、激素、神经递质、酶、抗凋亡因子、血管生成因子、已知在病理疾病中突变的任何蛋白例如“运动神经元存活”蛋白(SMN)。

18.权利要求2～17任一项的方法，其中所述多系统疾病选自神经退行性疾病、神经肌肉疾病、疼痛、溶酶体疾病、创伤、骨髓疾病、神经系统肿瘤、脱髓鞘性疾病、神经系统的自身免疫疾病、神经毒性综合征、睡眠障碍。

19.前述权利要求任一项的方法，其包括单次CSF-血液联合施用。

20.一种在需要的哺乳动物中治疗SMA的方法，所述方法包括向所述哺乳动物的脑脊液和血液联合施用包含SMN基因的tAAV载体，所述联合施用导致SMN蛋白在神经系统以及外周组织和器官中表达并允许对SMA进行治疗。

21.一种试剂盒，其包含两个单位剂量的包含治疗基因的tAAV载体，其中一个单位剂量适用于全身注射，一个单位剂量适用于注射到CSF中。