[发明专利]基于凝集素的递送系统

说明书

技术领域

本发明总体上涉及递送系统，更具体的，涉及基于凝集素的递送系统。

本发明尤其是在癌症治疗中具有应用。

现有技术

最近医药领域的研发关注基于蛋白质的递送系统。这些基于蛋白质的平台是用于医疗领域的非常好的候选者。实际上，这些系统显示出良好的生物相容性、生物降解性和低毒性。

大量蛋白质已经被用作用于递送药物(包括铁蛋白/脱铁铁蛋白、各种病毒的衣壳、白蛋白、麦醇溶蛋白等)的系统。这些蛋白质递送系统具有多种形式，例如微球、纳米颗粒、水凝胶、膜和蛋白笼。

基于蛋白质的递送系统(尤其是蛋白笼)似乎是有前景的递送系统，由于它们的均匀尺寸、它们的生物利用度和它们的生物降解性使得可以避免基于聚合物的递送系统的某些缺点(Maham等,2009)。

因此需要新的基于蛋白质的递送系统。除了它们的生物利用度和生物降解性特性，这些递送系统必须能够以简单和可重复的方式大量制备。

此外，这些递送系统必须设计为将治疗剂特异性递送到待处理的细胞以限制与该治疗相关的副作用。

因此，递送系统必须将治疗剂约束于它们的蛋白笼内并在其到达待治疗靶标时将其释放。

最后，递送系统必须易于表征，且它们的安全性必须说明。

发明简述

真菌子实体凝集素(也称为第2组蘑菇凝集素)家族是同时具有序列和结构同源性的真菌凝集素的家族。

该凝集素家族成员的序列同源性在Birck C等(2004)、Trigueros等(2003)和Khan等(2011)中有大量描述。

此外，某些成员的三维结构分析显示了结构相似性。因此，已表明红绒盖牛肝菌(Xerocomus chrysenteron)凝集素(XCL)(Birck C等(2004))、双孢菇(Agaricus bisporus)凝集素(ABL)(Carrizo M.等(2004))、和美味牛肝菌(Boletus edulis)凝集素(BEL)(Michele Bovi等(2011))这三个形成具有中央腔的四聚体。

该真菌子实体凝集素家族尤其包括双孢菇凝集素(ABL)、少孢节丛孢菌(Arthrobotrys oligospora)凝集素(AOL)、美味牛肝菌凝集素(BEL)、玉蜀黍赤霉(Gibberella zeae)凝集素(GZL)、红绒盖牛肝菌凝集素(XCL)、姬菇(Pleurotus cornucopiae)凝集素(PCL)和卷缘网褶菌(Paxillus involutus)凝集素(PIL)(Birck等,2004)(Crenshaw等,1995)。

本发明人已经成功地将活性剂约束于真菌子实体凝集素多聚体的腔室中，并表明如此限制的活性剂能够被递送到生物靶标。

真菌子实体凝集素用作约束络合物使得可以抑制，或至少减少，现有技术递送系统的全部或部分缺点。

实际上，这些凝集素具有对上皮肿瘤标志物的亲和性和特异性。

在该家族的成员中，有存在于蘑菇双孢菇(即白蘑菇)的凝集素ABL。这种蘑菇是世界上消费最多的蘑菇之一。因此，推理可以排除这种蛋白质对于人类的毒性或致敏性。

该家族的凝集素及其变体易于重组生产，因此可以达到极大量的生产和纯化(g/升)。

尤其是，这些凝集素随时间稳定(在4℃几个月，在室温几周)，且能很好地抵抗恶劣的物理化学条件(SDS、温度、离子强度)。

最后，除了它们可逆地约束活性剂的能力及其低毒性，这些凝集素形成具有可以包含活性剂的腔室的多聚体而不需要在该多聚体和它包含的活性剂之间的共价键。

因此，本发明的第一个方面涉及真菌子实体凝集素或真菌子实体凝集素的变体用于将作为治疗剂或诊断剂的活性剂递送到生物靶标的用途。

在第二个方面，本发明还涉及包含作为治疗剂或诊断剂的活性剂和真菌子实体凝集素或真菌子实体凝集素的变体的络合物。

希望改进这些凝集素在约束活性剂中的表现的同时，本发明人发现XCL(一种特别适于用作递送系统的凝集素)的某些变体具有改善的约束能力，且仍然保留其在到达靶标时释放活性剂的能力。本发明涉及此类变体，更具体的具有选自SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4的氨基酸序列的XCL变体。

本发明的另一个方面还提供：

–包含根据本发明的络合物和药学上可接受的赋形剂的药物组合物。