[发明专利]利用混合的多官能性表面降低蛋白制剂中聚集物含量的方法

权利要求书

1.降低含有所需蛋白的样品的聚集物含量的方法，其中所述方法包括如下步骤：(i)提供第一组件，其为具有负电性表面的第一固相基底；(ii)提供第二组件，其为具有正电性表面的第二固相基底，其中所述第一固相基底和所述第二固相基底被提供为夹在多孔的膜之间的多个多孔的颗粒；(iii)将所述样品与所述第一组件和第二组件接触，其中所述第一组件和第二组件经配置使得所述样品可同时接触两个组件，其中操作条件基本上阻止所述所需蛋白与所述第一组件或第二组件的结合；以及(iv)从所述第一组件和第二组件分离所得样品，所述所得样品含有所需蛋白并具有降低的聚集物含量，其中所述所需蛋白为抗体或抗体片段，所述第一组件的表面的负电性部分地由亚氨基二乙酸赋予，并且所述第二组件的表面的正电性部分地由三(2-氨基乙基)胺或聚丙烯亚胺四胺赋予。

2.如权利要求1所述的方法，其中在将所述样品与所述具有负电性表面的第一基底接触之前将所述样品与具有混合的化学特性的可溶性有机多价阳离子接触。

3.如权利要求2所述的方法，其中在将所述样品与所述第一组件和第二组件接触之前将所述样品与所述具有混合的化学特性的可溶性有机多价阳离子孵育一段合适的时间。

4.如权利要求1所述的方法，其中将所述样品与所述第一组件和第二组件孵育一段合适的时间。

5.如权利要求2所述的方法，其中在从所述第一组件和第二组件分离所述具有降低的聚集物含量的样品的步骤中，从所述样品中将所述具有混合的化学特性的有机多价阳离子去除至这样的程度，其使得所述具有混合的化学特性的有机多价阳离子与所述第一组件或第二组件的基底结合。

6.如权利要求1所述的方法，其中所述多孔的颗粒的孔径足够大，从而允许蛋白制剂中的蛋白进入。

7.如权利要求1所述的方法，其中所述多孔的颗粒的孔径太小，从而不能允许蛋白制剂中的蛋白进入。

8.如权利要求1所述的方法，其中所述多孔的颗粒的平均孔径为10nm至100nm。

9.如权利要求1所述的方法，其中所述颗粒被夹在织物或无定形纤维过滤器之间。

10.如权利要求1所述的方法，其中所述颗粒被夹在晶状熔块之间。

11.如权利要求2所述的方法，其中所述样品的电导率处于足够高的水平，从而当样品接触所述具有混合的化学特性的可溶性有机多价阳离子时，基本上避免所述所需蛋白从所述样品沉淀。

12.如权利要求11所述的方法，其中所述样品的电导率大于20mS/cm。

13.如权利要求12所述的方法，其中所述样品的电导率大于30mS/cm。

14.如权利要求13所述的方法，其中所述样品的电导率大于40mS/cm。

15.如权利要求14所述的方法，其中所述样品的电导率大于100mS/cm。

16.如权利要求1所述的方法，其中所述聚集物包含所述所需蛋白的均质聚集物。

17.如权利要求16所述的方法，其中基本上清除存在的所述所需蛋白的均质聚集物。

18.如权利要求1所述的方法，其中所述聚集物包含所述所需蛋白与污染物的异质聚集物。

19.如权利要求18所述的方法，其中所述异质聚集物具有与所述所需蛋白基本上相同的流体动力学尺寸。