[发明专利]CDK4/6抑制剂和B‑Raf抑制剂的药物组合

说明书

技术领域

本发明涉及一种用于治疗增殖性疾病的组合，该组合包含细胞周期蛋白依赖性激酶4/6(CDK4/6)抑制剂、B-Raf激酶抑制剂和任选的丝裂原活化蛋白激酶(MEK1/2或MEK)抑制剂。本发明也涉及该组合用于治疗增殖性疾病的用途，药剂组合的药物组合物和治疗患有增殖性疾病的个体的方法，其中该方法包括向个体施用治疗有效量的该组合。

背景技术

肿瘤形成与基因改变和细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)及其调节物的失调具有密切相关性，提示CDK抑制剂是有用的抗癌治疗剂。CDK的功能是磷酸化并因此使某些蛋白质活化或去活化。通过CDK介导的催化步骤涉及从ATP将磷酸转移至大分子酶底物的反应。已发现几组化合物(参见例如Fischer,P.M.Curr.Opin.Drug Discovery Dev.2001,4,623-634)由于CDK-特异性ATP拮抗作用而具有抗增殖性质。

在分子水平下，CDK/细胞周期蛋白复合物活性的介导需要一系列刺激性和抑制性的磷酸化或去磷酸化事件。CDK磷酸化是通过一组CDK活化激酶(CAK)和/或例如wee1,Myt1和Mik1的激酶进行。去磷酸化通过例如cdc25(a和c)、pp2a或KAP的磷酸酶进行。

CDK/细胞周期蛋白复合物活性可通过两个家族的内源性细胞蛋白质抑制剂(Kip/Cip家族或INK家族)进一步调控。INK蛋白质特异地结合CDK4和CDK6。p16ink4(也称为MTS1)是在许多原发性癌症中突变或被删除的潜在肿瘤抑制基因。Kip/Cip家族含有例如p21Cip1、Waf1、p27Kip1和p57kip2的蛋白质，其中p21被p53诱导且能使CDK2/细胞周期蛋白(E/A)复合物失活。已在乳腺癌、结肠癌和前列腺癌中发现非典型低水平的p27表达。相反地，已显示在实体肿瘤中的细胞周期蛋白E过表达与不良的患者预后相关。细胞周期蛋白D1的过表达与食道癌、乳腺癌、鳞状癌和非小细胞肺癌相关。

上文已提出CDK及其相关蛋白在协调和驱动增殖细胞中的细胞循环的关键作用。也描述了CDK在其中起关键作用的一些生化途径。因此，非常希望开发出使用靶向广泛CDK或特定CDK的治疗剂治疗增殖性病症(例如癌症)的单一疗法。因此需要持续寻找新的治疗试剂以治疗人类疾病。可用于本发明组合中的CDK4/6抑制剂已在公开的PCT专利申请WO2010/020675中一般性地和具体地描述，该申请以引用方式并入本文。

蛋白质激酶代表了一个大的蛋白质家族，其在各种不同细胞过程的调控和维持对细胞功能的控制中扮演核心的角色。已在许多疾病状态中观察到异常的激酶活性，包括良性和恶性增殖性病症，以及由免疫和神经系统的不当活化引起的疾病。

Ras-Raf-MEK-ERK信号路径将来自细胞表面受体的信号传递到细胞核，是细胞增殖和生存所必需的。由于10-20％的人类癌症存在致癌性的Ras突变且许多人类癌症具有活化的生长因子受体，所以这个路径是理想的干预目标。

丝氨酸/苏氨酸激酶的Raf家族包括三个成员：C-Raf(或Raf-1)、B-Raf和A-Raf。已在～70％黑色素瘤、40％乳头状甲状腺癌、30％低度卵巢癌和10％结肠直肠癌中确认活化B-Raf的等位基因。大部分B-Raf突变出现在激酶结构域内，其中单一取代(V600E)占80％。突变的B-Raf蛋白质会通过针对MEK升高的激酶活性或通过活化C-Raf来激活Raf-MEK-ERK路径。在本发明组合疗法中的B-Raf抑制剂是通过阻断在这类癌细胞中的信号级联和最终诱导停滞和/或死亡来抑制涉及B-Raf激酶的细胞过程。可用于本发明组合中的B-Raf抑制剂已在公开的PCT专利申请WO2011/025927中被一般性地和具体地描述，该申请以引用方式并入本文。

MEK也是RAS/RAF/MEK/ERK路径中的主要蛋白质，其针对细胞增殖和生存传递信号，并经常在RAS或RAF致癌基因或生长因子酪氨酸激酶发生突变的肿瘤中被活化。虽然在癌症中极少发生突变，但由于其在RAS/RAF/MEK信号传导路径的信号级联放大中的关键位置，MEK1和MEK2蛋白质抑制剂也被作为小分子抑制作用的靶向。