[发明专利]环节动物血红蛋白冷冻干燥法

权利要求书

1.包含环节动物的至少一种细胞外血红蛋白、一种珠蛋白原体或一种珠蛋白，和一种选自双糖、多元醇和抗氧化剂的稳定剂的冻干物。

2.组合物，包含：

-含有环节动物的至少一种细胞外血红蛋白、一种珠蛋白原聚体或一种珠蛋白的溶液，和

-一种选自海藻糖和抗坏血酸的稳定剂。

3.如权利要求1所述的冻干物或如权利要求2所述的组合物，其中所述环节动物的细胞外血红蛋白选自多毛纲环节动物的血红蛋白，优选选自沙蠋科(Arenicolidae)的细胞外血红蛋白和沙蚕科(Nereididae)的细胞外血红蛋白，更优选选自海沙蠋(Arenicola marina)的细胞外血红蛋白和沙蚕(Nereis)的细胞外血红蛋白。

4.如权利要求1或3所述的冻干物，其中所述稳定剂选自海藻糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇和抗坏血酸，优选选自海藻糖和抗坏血酸。

5.制备如权利要求1、3或4中任一项所述的冻干物的方法，包括：

i)将包含环节动物的至少一种细胞外血红蛋白、一种珠蛋白原聚体或一种珠蛋白的溶液与选自双糖、多元醇和抗氧化剂的稳定剂混合；

ii)将i)中所得混合物在-10℃至-100℃，优选-20℃至-100℃的温度下冷冻至少24小时；

iii)将ii)所得冷冻混合物在真空下升华至少2小时；

iv)将iii)所得混合物最终干燥直至获得粉末。

6.如权利要求5所述的方法，其中选自双糖和多元醇的所述稳定剂以1-500mg/ml的浓度存在于步骤i)的混合物中。

7.如权利要求5所述的方法，其中所述选自抗氧化剂的稳定剂以3-20mM的浓度存在于步骤i)的混合物中。

8.如权利要求5-7中任一项所述的方法，其中存在于步骤i)的混合物中的所述稳定剂选自以50-70mg/ml，优选约为55mg/ml或65mg/ml的浓度存在的海藻糖或蔗糖，约为100mg/ml的浓度存在的海藻糖或蔗糖，以50-100g/l的浓度存在的甘露醇，和以约为5mM的浓度存在的抗坏血酸。

9.如权利要求5-8中任一项所述的方法，其中步骤ii)的所述冷冻在-10℃至-90℃，优选-20℃至-90℃的温度下进行至少24小时。

10.如权利要求5-8中任一项所述的方法，其中步骤iii)的所述升华进行至少4小时。