[发明专利]可诱导共表达系统有效
申请号: | 201380041522.X | 申请日: | 2013-08-05 |
公开(公告)号: | CN104603274B | 公开(公告)日: | 2020-08-18 |
发明(设计)人: | S·麦克莱恩;M·瓦拉塞克 | 申请(专利权)人: | ABSCI有限责任公司 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70 |
代理公司: | 北京市金杜律师事务所 11256 | 代理人: | 陈文平;徐志明 |
地址: | 美国俄*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 诱导 表达 系统 | ||
1.一种大肠杆菌宿主细胞,包含两个或更多个类型的表达构建体,其中:
所述两个或更多个类型的表达构建体的各类型包含诱导型启动子和编码由所述诱导型启动子转录的基因产物的多核苷酸序列;
第一诱导型启动子是丙酸盐诱导启动子且第二诱导型启动子是L-阿拉伯糖诱导启动子;
至少一个所述基因产物选自(a)免疫球蛋白重链、(b)免疫球蛋白轻链和(c)锰过氧化物酶的多肽,其中所述多肽缺乏信号肽;
至少一个所述基因产物与另一个基因产物形成多聚体;且
所述宿主细胞的gor和trxB基因的基因功能降低,且包含编码缺乏信号肽的DsbC形式的多核苷酸。
2.权利要求1的宿主细胞,其中所述第一诱导型启动子是prpBCDE启动子和所述第二诱导型启动子是araBAD启动子。
3.权利要求1的宿主细胞,其中至少一个类型的表达构建体进一步包含编码与诱导型启动子结合的转录调节子的多核苷酸序列。
4.权利要求3的宿主细胞,其中所述编码转录调节子的多核苷酸序列及所述转录调节子与其结合的诱导型启动子在相同的表达构建体中。
5.权利要求3的宿主细胞,其中所述转录调节子选自AraC和PrpR。
6.权利要求1的宿主细胞,其中至少一个表达构建体通过包括将多核苷酸序列插入选自pBAD24和pPRO33的质粒中的步骤的方法产生。
7.权利要求1的宿主细胞,其中所述基因产物是免疫球蛋白轻链。
8.权利要求1的宿主细胞,其中所述基因产物是免疫球蛋白重链。
9.权利要求1的宿主细胞,其中所述多肽是锰过氧化物酶。
10.权利要求9的宿主细胞,其中所述宿主细胞包含编码蛋白质二硫键异构酶(PDI)的至少一个多核苷酸。
11.权利要求1的宿主细胞,其中所述宿主细胞包含两个类型的表达构建体。
12.权利要求1的宿主细胞,其中所述各个类型的表达构建体包含与各其它类型的表达构建体的诱导型启动子不同的诱导型启动子。
13.权利要求1的宿主细胞,其中所述各个类型的表达构建体包含与各其它类型的表达构建体的复制起点不同的复制起点。
14.一种包含权利要求1-13任一项的宿主细胞的试剂盒。
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