[发明专利]微生物的检查方法及其装置

说明书

本发明提供一种用于测定试样溶液中的微生物量的微生物的检查装置(1)，具备：搅拌混合机构(7)，在以透光材质形成的试样容器(5)进行添加有试样与荧光染色试剂的试样溶液的搅拌、混合；激发光源(10)，通过搅拌混合机构(7)搅拌试样溶液(5)并具备对试样容器(5)的被照射面照射激发光的光源；光接收机构(14)，检测通过来自激发光源(10)的激发光而荧光发光的光线，并转换为电气信息；以及控制机构(23)，通过来自光接收机构(14)的电气信息检测发光数，根据该发光数计算出试样容器(5)中的试样所含的微生物量。

技术领域

本发明涉及微生物的检查方法及其装置，尤其涉及适合检测包含于压舱水等并在其中生存的浮游生物等微生物的微生物的检查方法及其装置。

背景技术

未载运行李的船舶，为了使该船舶稳定而搭载压舱水航行，在载运行李的海域中将所搭载的该压舱水排出。

压舱水一般而言，因在与搭载的海域不同的海域排出，因此该压舱水所含有的浮游生物或细菌等微生物被载运至原本的栖息地以外的海域，有引起破坏生态系统等的问题的疑虑。

为了处理这种问题，策划关于压舱水的管制的国际性规则，采纳“用于控制及管理船舶的压舱水及沉淀物的国际条约(压舱水管理条约)”。

关于上述压舱水管理条约的“对于压舱水采样的指引(G2)”，在“压舱水排出基准(D―2)”中，将自船舶排出的压舱水所含有而生存于其中的微生物的容许个体数，以该微生物的最小尺寸加以区分规定。例如以如下方式规定：对于最小尺寸为50μm以上的微生物(以下称作“L尺寸生物”)为10个/m3以下，对于最小尺寸为10μm以上未满50μm的微生物(以下称作“s尺寸生物”)为10个/mL以下。

至今为止，作为测量在上述压舱水等水中栖息的微生物细胞的方法，已知有专利文献1记载的方法。

上述专利文献1记载的方法为一种微生物细胞的活细胞的测量方法：首先，使与存在于微生物的活细胞的酶或辅酶反应并在细胞内产生荧光物质的化学物质，与含有微生物的测定对象试样作用。其次，进行一定时间的混合接触，对试样照射激发细胞内产生的荧光物质所必须的波长的光线。之后将试样中自各个微生物发出的光以点的数量加以测量。

由此，将以往的洋菜培养方法中必须的10小时～数十小时的测定时间显着地提早为10分钟以内。此外，将活菌发出的光作为点通过建立光学性地、电性地检测测量的手段而可将活菌直接自动计数，具有可使杀菌装置的控制、制品质量的迅速管理快速地进行的优点。

然而，上述专利文献1记载的方法，因水的种类、温度、染色剂的种类、浓度、染色时间等的不同而有测定值产生差异的情形。

作为其他方法，已知有：为了确认将上述压舱水排出时是否满足上述排出基准，使以送水泵汲取的海水在流通槽流通并进行影像量测的方法(例如专利文献2)；使以送水泵汲取的海水在孔隙不同的过滤单元流通，使滤网上的微生物发光并计算微生物数量(例如专利文献3)等的微生物检查装置。

上述专利文献2记载的微生物检查装置具备：染色部，使液体的试样流动并将存在于该试样中的具有活细胞的生物染色；浓缩部，使施加该染色的检测体流动并浓缩以使该生物的浓度提高；个体量测部，取得该浓缩的检测体中的含有该生物的个体的影像信息；以及控制机构，通过以该个体量测部输出的该个体的影像信息进行该生物的测定。

由此，由于可将检测体的液体中的生物的染色步骤、液体中的生物的浓缩步骤、液体中的生物的信息取得步骤等一连串地进行，因此与个别进行各方式的手法相比，可将结束一个步骤试样的一部分前进至下一步骤为止的待机时间大幅地缩短，或使其为0，在防止待机时间的染色状态的劣化的意味下具有可获得稳定的生物死活的信息等优点。

然而，上述专利文献2记载的微生物检查装置，为了使以送水泵汲取的海水于各种步骤依序流通，因此装置大型化，制造成本变高。并且测定结束有至少花费数小时的情形。