[发明专利]肽溶液的灌装加工法

说明书

序列表

本说明书参考于2013年7月3日作为命名为“2004837-0032_Sequences_ST25”的ASCII.txt文件以电子形式提交的序列表。该.txt文件于2013年6月10日生成，大小为11KB。

发明背景

可向患者施用纯化的蛋白质和/或肽混合物以用于多种治疗用途。经制备用于向患者施用的肽溶液在使用前必须是无菌的。肽和生物技术产品的纯化和包装通常可以是异常困难的。所述产品非常复杂，可能对光、温度、压力、pH、辐射、机械干扰敏感并且另外地对环境条件敏感。此外，该产品可发生物理改变或容易降解，即使在理想的加工条件下亦如此。用于一些蛋白质(包括寡肽)的合适的灭菌方法包括肽溶液的过滤。可定制过滤器的尺寸来保留(即从肽溶液中除去)颗粒、微生物和病毒，同时蛋白质能够通过膜。

因此，人们希望开发以大体上不损坏肽的方式过滤和包装肽溶液的方法，然而该方法仍允许随时间推移的适当高的处理通量(即，过滤速度)。此外，人们希望开发通常适用于任何蛋白质的过滤法，以便可以以高效率过滤(例如，无菌过滤)一般肽而不发生肽的重大损坏/损失。

发明概述

在各种实施方案中，本发明包括制造和纯化肽溶液的方法。在一些实施方案中，该方法包括以下步骤：第一脱气步骤，其中通过降压 来对含肽混合物进行脱气；通过无菌过滤器过滤所述混合物；和第二脱气步骤，其中通过振动和降压来对滤液进行脱气。

在一些实施方案中，制造和纯化本发明的肽溶液的方法不包括将混合物通过无菌过滤器进行过滤。实际上，在一些实施方案中，本发明的一个方面是认识到，某些特定肽溶液可具有使得它们顺从于对于其它肽溶液可以是有效的或可以是无效的特定制备方法的特征。在一些实施方案中，不利用过滤器的方法是想要的。可选地或此外，在一些实施方案中，提供的制造和纯化本发明的肽溶液的方法包括无需过滤的热灭菌。在一些实施方案中，本发明涵盖认识：不需要过滤的某些肽溶液顺从于使用包括热灭菌和/或不包括过滤的方法进行的制造和/或纯化。

在一些实施方案中，包括过滤步骤的方法利用具有小于约0.45μm的平均孔径的无菌过滤器。

在一些实施方案中，第一脱气步骤包括以小于约-0.1MPa/分钟的速率降低混合物的压力。在一些实施方案中，第一脱气步骤包括使压力降低约至少-0.05MPa。在一些实施方案中，将更低的压力维持至少约30分钟。

在一些实施方案中，第二脱气步骤包括以150转/分钟振动混合物，并且振动运动的偏心距离在位置编号6与8之间。在一些实施方案中，第二脱气步骤包括使压力降低约至少-0.05MPa。

在一些实施方案中，所述方法还包括将肽与溶剂混合，随后进行第一脱气步骤。

在一些实施方案中，利用的肽溶液为RADA-16(SEQ ID NO:1)肽溶液。在一些实施方案中，利用的肽溶液为IEIK13(SEQ ID NO:39)肽溶液或包含IEIK13(SEQ ID NO:39)肽溶液。在一些实施方案中，利用的肽溶液为表1中出现的肽的溶液。在一些实施方案中，利用的 肽溶液为表2中出现的肽的溶液。在一些实施方案中，利用的肽溶液为两种或更多种肽的溶液。

在一些特定实施方案中，本发明提供了不存在一个或多个过滤步骤的制造和纯化IEIK13(SEQ ID NO:39)的方法。在一些实施方案中，本发明提供了不包括任何过滤步骤的制造和纯化IEIK13(SEQ ID NO:39)的方法。本发明的一个特征是其认识到，至少对于某些IEIK13(SEQ ID NO:39)溶液，这样的过滤可能不是灭菌所需的。

在一些实施方案中，溶剂为水。在一些实施方案中，所述方法还包括在第二脱气步骤之后用混合物对制品进行无菌灌装。在一些实施方案中，在第二脱气步骤后至少5小时灌装所述制品。在一些实施方案中，以至少约2个制品/分钟、约3个制品/分钟、约4个制品/分钟、约5个制品/分钟、约6个制品/分钟、约7个制品/分钟、约8个制品/分钟、约9个制品/分钟、约10个制品/分钟、约11个制品/分钟、约12个制品/分钟、约13个制品/分钟、约14个制品/分钟、约15个制品/分钟、约16个制品/分钟、约17个制品/分钟、约18个制品/分钟、约19个制品/分钟或约20个制品分钟或其倍数的速率灌装制品；在一些实施方案中，以约100、200、300、400、500、600、700、800、900或约1000或更多个制品/小时的速率灌装制品。