[发明专利]利用netrin-1干扰药物和化疗药物的联合治疗

说明书

本发明涉及治疗癌症的新型组合的组合物和方法。

最近提出netrin-1(最初发现作为轴突导航因子(1)的可溶性蛋白质)通过调节细胞凋亡在癌症进展中起着至关重要的作用(2,3)。实际上，netrin-1受体DCC和UNC5H-即UNC5H1、UNC5H2、UNC5H3和UNC5H4(也称为UNC5A、UNC5B、UNC5C或UNC5D)-属于所谓的依赖性受体家族(4)(5)(6)。这些依赖性受体因其诱导细胞死亡(当从其配体释放时)的能力而产生依赖于它们各自配体的细胞状态(7)，并因此可表现为肿瘤抑制因子，因为它们消除可在配体不可用的背景中产生的肿瘤细胞(2，8)。在这一点上，具有针对其促细胞凋亡活性被灭活的DCC受体的小鼠发生自发性结直肠癌，并且更易于发生肠肿瘤进展(9)。类似地，小鼠中UNC5H3/C在胃肠道中的失活与肠肿瘤进展相关(10)。

因此，根据依赖性受体模型，侵袭性人肿瘤的进展应当需要该死亡途径的失活。存在至少三种方式来实现该生存优势：netrin-1受体的表达的丧失，如在人结直肠癌中针对DCC和/或UNC5H详尽描述的(10-13)；丧失通过DCC或UNC5H诱导的下游死亡信号转导；获得配体的自分泌或旁分泌表达。有趣地，已显示netrin-1在相当大部分的转移性乳腺癌、肺癌、卵巢癌和胰腺癌中、在与结直肠癌相关的炎症中和在成神经细胞瘤中被上调(14-19)。在体外和在癌症的小鼠或鸡模型中的概念证明研究已显示，通过netrin-1s iRNA或干扰netrin-1受体相互作用导致的netrin-1的沉默与肿瘤细胞死亡和与肿瘤生长和转移瘤的抑制相关(14-18)。这些后来的研究提出，破坏netrin-1对其受体的结合可代表大部分癌症中的高效抗癌策略，在所述癌症中netrin-1以自分泌或旁分泌的方式表达。早期药物开发集中在模拟与netrin-1相互作用的受体的生物试剂-生物制剂上(20)。

一些其它工作集中在netrin-1及其受体在血管生成中的作用，希望血管生成的调控可帮助抑制肿瘤进展。US2006/0153840公开了netrin-1受体活性的调节可激活或抑制血管生成，并提出了减少或增加血管生成的策略。该文献公开了netrin-1受体或其片段用作为促血管生成物质的用途，以及包含netrin-1受体和免疫球蛋白的Fc片段的融合蛋白用作促血管生成多肽的用途。该文献教导，netrin-1诱导的抗血管生成作用可通过阻断netrin-1对其受体诸如UNC5H2(也称为UNC5B)的可用性来逆转，并且抑制或阻断netrin-1受体的活性可诱导强的血管生成。WO2010/059821公开了UNC5B在静息成人脉管系统中被下调，但在植入肿瘤的出芽式血管生成期间中重新表达，激动剂(Netrin-1)对表达UNC5B的新生血管的刺激抑制出芽式血管生成以及UNC5B的功能的遗传丢失可减小Netrin-1介导的血管生成抑制。该文献暗示UNC5B活化抑制出芽式血管生成，并且UNC5B会是潜在的抗血管生成靶。该文献随后提出抑制UNC5B的活性或抑制netrin-1对该受体的结合的抗-UNC5B抗体用作抗血管生成剂和用作治疗特征在于异常血管发生的疾病诸如癌症的试剂的用途。WO2006/054000公开了抗-netrin-1抗体用作抗血管生成剂的用途以及其在治疗癌症的组合物中的用途。两个最近的文献进一步提出将抗UNC5B或抗-netrin-1抗体组合至现有的化疗药物。在不存在关于这些相互矛盾的公开内容的一致实验结果的情况下，本领域普通技术人员难以在抗-netrin-1或抗UNC5H2抗体对血管生成的影响上达成某些明确的教导，更不用说关于潜在的抗肿瘤活性了。本领域普通技术人员还难以建立已知影响增殖的肿瘤细胞而非形成血管的静息内皮细胞的化疗药物与基于抗netrin-1或抗-UNC5H2抗体的抗生管生成治疗之间的生物联系。

然而本发明提供了将基于netrin-1干扰的治疗与作为肿瘤细胞的应激反应的结果，增加肿瘤细胞存活对netrin-1的依赖性的化疗药物组合的生物原理。