[发明专利]由向日葵获得富含咖啡酰奎宁酸的提取物的方法

说明书

技术领域

本发明涉及用于预防和治疗血脂异常、高血糖和高血压、代谢综合征和2型糖尿病的去油向日葵(helianthus annuus)的种子提取物。本发明还涉及制备所述提取物的方法及含有所述提取物的组合物。本发明的提取物可以显著降低超重或肥胖患者的餐后和基线血糖水平以及血液甘油三酯水平。当本发明的提取物与大分子复合，并加至富含淀粉性碳水化合物的食物中后，可以降低其血糖指数。

背景技术

向日葵提取物极少用于中医和对抗疗法中；但是，向日葵种子却被广泛用于油的工业化生产中，生物质耗尽的残渣主要被用作动物饲料或用于生产沼气。

向日葵油是一种极佳的种子油，特征在于甘油酯含量非常可观，它可以调节脂肪的肠吸收。当种子为完整的或剥离了其外壳后，它们包含了变量的以奎宁酸的单和二酯形式存在的咖啡酰奎宁酸，其中绿原酸占优势。

发明内容

现已惊奇地发现，通过以下所述的提取方法，可以得到咖啡酰奎宁酸含量较高的提取物，该提取物具有有效降低餐后血糖和基线血糖水平的活性。

因此，本发明涉及向日葵提取物、其制备方法及含有该提取物的组合物。

根据本发明的方法包括：

a)用脂肪醇水混合物对向日葵的工业残渣进行提取；

b)真空浓缩得自步骤a)的水醇溶液至乙醇溶剂完全除去，然后滤除不溶物和残余的脂相；

c)将得自步骤b)的水溶液的pH值调节至约4.5±1；

d)通过400Da的有机膜对得自步骤c)的水溶液进行超滤；

e)对得自步骤d)的溶液进行色谱或纳滤(nanofiltration)；

f)真空或通过雾化浓缩得自步骤e)的截留物。

在步骤a)中，“向日葵的工业残渣”指用已烷进行热提取、随后在100℃以上的温度下去除溶剂(“去溶剂化”)后得到的向日葵种子提取物。

根据本发明的一个优选方面，步骤a)的提取过程在能够将pH值保持在2以下的有机酸或无机酸(优选稀硫酸)存在下用乙醇/水混合物进行至单-和二-咖啡酰喹尼酸耗尽，优选80％v/v的乙醇/水混合物。

根据本发明的一个优选方面，在步骤c)中，水溶液的pH值采用碳酸钙调节至约4.5±1。

得自步骤c)的水溶液，在使用聚苯乙烯树脂和/或离子交换和吸附树脂上进行吸附树脂色谱，或者采用截留值为400～600Da的陶瓷膜进行纳滤，以除去盐和不需要的低分子量产物。截留物中保留咖啡酰奎尼酸，而盐和糖则保留在渗透物中。

本发明的制备方法具有特别的工业意义，因为生物质实质上是可以无限获得的而且其成本可以忽略不计，所以从方法的经济学而言具有显著的意义并可显著降低获得提取物的最终成本。

通过本发明方法得到的提取物的特征在于该提取物具有高含量的咖啡酰奎宁酸，对餐后和基线血糖水平显示有效的降糖活性。如果将适量的本产品加至富含碳水化合物的食物中，所述作用仍可被保持，此为这种新提取物在饮食领域中的主要应用。

去溶剂化中使用的热处理方法和提取步骤中的酸处理可以使结构得以修饰，由此使提取物的生物学活性在抗氧化和促新陈代谢效应方面得到提升。处理方法裂解了蛋白结构之间的化学键，转变为醌形式的咖啡酰奎宁酸在Michael反应中与蛋白质的SH基团结合或与常常存在于植物多酚中的氨基反应。

优选按照本发明的方法获得的向日葵提取物中的咖啡酰奎宁酸含量范围为40％－80％，优选50％－60％。

本发明的提取物可被方便地配制为富含甘油二酯的油用于人类疾病的治疗，制剂可以含有或不含有磷脂作为表面活性剂载体，或者将该提取物加至各种食物中，例如面包、各种类型的饼干和一般不能耐受高温水洗的食物，这是由于活性成分可自由地溶于水。有鉴于此，咖啡酰奎宁酸可以通过与植物或动物蛋白质形成复合物变得不溶于水，这些蛋白通过热变性后可以稳定形式掺入。蛋白质被酶水解后在肠中释放出活性产物，该活性产物可以在肠内与其他底物相互作用并改善糖的吸收，抑制6磷酸合成酶。

已经观察到，当将提取物添加至富含淀粉性碳水化合物的食物中时，该提取物可以显著降低餐后血糖水平。

根据本发明，提取物以营养制剂的形式与含有淀粉性碳水化合物一起每餐服用时的剂量范围通常为50－500mg，优选250mg。

临床试验结果如下。

餐后血糖水平