[发明专利]用于产生棒麦角素型生物碱的基因和方法

权利要求书

1.一种酵母，其包含

a)至少一个表达盒，所述表达盒包含编码具有EasH活性的多肽的多核苷酸，所述多肽由与SEQ ID NO:8和/或95具有至少99％或100％序列同一性且来源于日本曲霉菌株或Paecilomyces divaricatus菌株的氨基酸序列组成；以及

b)至少一个表达盒，所述表达盒包含编码具有EasA还原酶活性的多肽的多核苷酸，所述多肽由与SEQ ID NO:2具有至少99％或100％序列同一性且来源于日本曲霉菌株的氨基酸序列组成，以及

c)至少一个表达盒，所述表达盒包含编码具有EasG活性的多肽的多核苷酸，所述多肽由与SEQ ID NO:7具有至少99％或100％序列同一性且来源于日本曲霉菌株的氨基酸序列组成；以及

d)至少一个表达盒，所述表达盒包含编码具有EasD活性的多肽的多核苷酸，所述多肽由与SEQ ID NO:4具有至少99％或100％序列同一性且来源于日本曲霉菌株的氨基酸序列组成，以及

e)至少一个表达盒，所述表达盒包含编码具有EasC活性的多肽的多核苷酸，所述多肽由与SEQ ID NO:3具有至少99％或100％序列同一性且来源于日本曲霉菌株的氨基酸序列组成；以及

f)至少一个表达盒，所述表达盒包含编码具有EasE活性的多肽的多核苷酸，所述多肽由与SEQ ID NO:5和/或69具有至少99％或100％序列同一性且来源于日本曲霉菌株或Neotyphodium lolii菌株的氨基酸序列组成；以及

g)至少一个表达盒，所述表达盒包含编码具有EasF活性的多肽的多核苷酸，所述多肽由与SEQ ID NO:6和/或76具有至少99％或100％序列同一性且来源于日本曲霉菌株或烟曲霉菌株的氨基酸序列组成；以及

h)至少一个表达盒，所述表达盒包含编码具有DmaW活性的多肽的多核苷酸，所述多肽由与SEQ ID NO:19和/或28具有至少99％或100％序列同一性且来源于日本曲霉菌株或麦角菌(Claviceps purpurea)菌株的氨基酸序列组成。

2.根据权利要求1所述的酵母，其包含选自如下化合物组的至少一种化合物：

a)环棒麦角素，

b)狐茅麦角碱，

c)田麦角碱，

d)裸麦角碱醛和

e)裸麦角碱I。

3.重组多核苷酸，其包含权利要求1中描述的(a)的至少一个表达盒、(b)的至少一个表达盒、(c)的至少一个表达盒、(d)的至少一个表达盒、(e)的至少一个表达盒、(f)的至少一个表达盒、(g)的至少一个表达盒和(h)的至少一个表达盒。

4.权利要求3的重组多核苷酸，其中所述重组多核苷酸是载体。

5.用于产生环棒麦角素、狐茅麦角碱、田麦角碱、裸麦角碱醛或裸麦角碱I中至少一者的方法，包括：

a)培养根据权利要求1或2所述的酵母，其中所述培养在允许该酵母中产生环棒麦角素、狐茅麦角碱、田麦角碱、裸麦角碱醛或裸麦角碱I中至少一者的条件下进行；和

b)从该酵母和/或培养基获得所述环棒麦角素、狐茅麦角碱、田麦角碱、裸麦角碱醛和/或裸麦角碱I。

6.用于产生环棒麦角素、狐茅麦角碱、田麦角碱、裸麦角碱醛或裸麦角碱I中至少一者的方法，包括：

a)培养根据权利要求1或2所述的酵母，其中所述培养在允许该酵母中产生环棒麦角素、狐茅麦角碱、田麦角碱、裸麦角碱醛或裸麦角碱I中至少一者的条件下进行；

b)通过培养基向所述酵母提供选自IPP、色氨酸、DMAPP、DMAT、Me-DMAT或裸麦角碱I的至少一种化合物，和

c)从该酵母和/或培养基，获得所述环棒麦角素、狐茅麦角碱、田麦角碱、裸麦角碱醛或裸麦角碱I。

7.根据权利要求5或6所述的方法，其中产生并获得环棒麦角素。

8.根据权利要求5或6所述的方法，其中将裸麦角碱醛提供给培养基并且产生和获得环棒麦角素。