[发明专利]前列腺特异性肿瘤抗原及其用途

说明书

背景技术

前列腺癌已经成为美国男性中最常见的癌症，并且是美国男性第二大的癌症死因[1]。对大多数前列腺癌患者标准处理为手术和/或放疗。然而，上至30％的患者手术或放疗后仍发生疾病复发。尽管雄性激素阻断治疗是抗复发疾病的有效治疗方法，大多数这些患者最终发展为雄性激素难治型前列腺癌，其对传统治疗不敏感。因此，迫切需要更有效和较小毒性的疗法。已经经显示免疫治疗是有前景的前列腺癌治疗方法，特别是对转移性去势抗性前列腺癌的患者[2-4]，控制免疫系统消除恶性细胞是有前景的癌症治疗方法，但是直至最近其也只取得零星的临床成功[4-6]。最近食品药品管理局(FDA)批准基于免疫治疗的疫苗/药物sipuleucel-T(Provenge)和ipilimumab(Yervoy)代表着癌症免疫治疗领域的里程碑[7,8]。此外，黑色素瘤的gp100肽III期临床实验也产出了非常令人鼓舞的临床结果[9]。然而，报道的这些药剂的临床受益远达不到完全的应答和永久的治愈。就sipuleucel-T而言，患者的生存受益仅为4.1个月，没有客观的肿瘤倒退或者前列腺特异性抗原(PSA)水平的实质性变化。使用动物模型的最近研究进一步揭示了肿瘤特异性抗原在诱发对抗发展肿瘤的免疫反应中的重要性[10]，这推动了更多的努力来鉴别这样的癌症免疫治疗用抗原。此外，由于某些主要排斥抗原可能因T细胞选择和杀灭而丢失或者改变[11]，最好的策略是针对个体肿瘤上存在的多种肿瘤抗原来免疫治疗。

至今，已经明确了多种前列腺特异性肿瘤抗原，包括PSA[12,13]，prostein[14,15]，前列腺干细胞抗原(PSCA)[16]，前列腺特异性膜抗原(PSMA)[17-19]，前列腺酸性磷酸酶(PAP)[20]，和瞬时受体电位p8(trp-p8)[21]。此外，已经描述了衍生自这些肿瘤抗原的HLA I类限制性表位[22]。基于单一肿瘤抗原的免疫治疗的一个缺点是可能发生免疫逃逸。因此，需要鉴别另外的前列腺癌特异性抗原以发展更有效和抗原特异性的疫苗用于转移性前列腺癌患者。

发明内容

前列腺特异性G蛋白耦联受体(PSGR)是G蛋白耦联嗅觉受体家族的成员，并且相比正常前列腺细胞在前列腺癌细胞中高度表达[23-25]，这表明可以针对PSGR发展抗前列腺癌的新免疫治疗策略。

我们确定了PSGR被T细胞识别，并描述了T细胞识别所用的PSGR衍生T细胞表位。选择并合成了预测与HLA-A2分子结合的21种肽，并基于ELISA或ELISPOT检验所测量的干扰素γ(IFN-γ)释放体外评估了其刺激来自健康对象和前列腺癌患者的PBMCs中T细胞的能力。发现3种肽，即PSGR3，PSGR4和PSGR14(见下文和表1)诱导来自健康对象和前列腺患者的外周T细胞中的IFN-γ释放。重要的是，这些肽特异性T细胞能以HLA I类依赖性方式识别HLA-A2⁺，表达PSGR的LNCaP细胞。

因此，在一个实施方式中，本发明提供了组合物，包括PSGR3，PSGR4或PSGR14的氨基酸序列组成的多肽，或者这三种肽中两种或更多种的组合，以及药学可接受载体。

在一个方面，本公开提供了治疗或预防前列腺癌的方法，包括给需要其的患者施用有效量的本发明的组合物。

在实施方式中，本公开提供了在人患者中治疗前列腺癌的方法，包括给患者施用有效稳定或降低血清前列腺特异性抗原(PSA)，特别是PSGR水平的量的本公开组合物的步骤。在某些方面，本公开的方法进一步包括施用粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)。在一些方面，组合物和GM-CSF被共同施用，并且在进一步的实施方式中所述组合物和GM-CSF被同时施用，而在更进一步的实施方式中所述组合物和GM-CSF被顺序施用。

在某些实施方式中，PSGR被以分别负载PSGR肽的树突细胞的组合物来施用，例如在多次注射中。

本公开的组合物或疫苗的施用在各方面可以是皮内的。因此，本公开也提供了疫苗，包括：(i)PSGR3，PSGR4或PSGR14的氨基酸序列组成的多肽，或者这三种肽中两种或更多种的组合，和(ii)药学可接受载体。在某些方面，疫苗进一步包括粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)。在进一步的方面，疫苗进一步包括有效增加T细胞免疫应答的量的toll样受体9(TLR9)激动剂。在一个具体的方面中，TLR9激动剂为CpG-寡脱氧核苷酸(CpG-ODN)。

在进一步的实施方式中，疫苗进一步包括有效增加T细胞免疫应答的量的CTLA4抑制剂，并且在具体的方面中CTLA4抑制剂为单克隆抗体。