[发明专利]抗人巨细胞病毒感染的基于重组颗粒的疫苗

说明书

技术领域

本发明涉及包含衣壳蛋白、巨细胞病毒表面蛋白和任选存在的间层蛋白的病毒样颗粒，以及抗人巨细胞病毒感染的疫苗。

背景技术

在世界各地和所有社会经济群体中均发现了人巨细胞病毒(HCMV)。其感染至少60％的成年人；在一些国家中，已达到100％地方性感染。通常感染在免疫正常的个体中是无症状的；有时，可以发生单核细胞增多症样疾病。感染总是导致建立终生潜伏，但可能间断重新激活。作为HCMV感染的结果，免疫缺陷的个体如治疗或医源性免疫抑制的移植/癌症患者、新生儿以及HIV患者存在显著的发病率和死亡率。

目前CMV感染的疗法是用抗病毒试剂如更昔洛韦(缬更昔洛韦)、膦甲酸、阿昔洛韦、西多福韦或来氟米特进行治疗。已批准这类抗病毒剂应用于移植受体和免疫低下的患者(例如HIV患者)，但是不可应用于孕妇。对于这些，优选高-免疫球蛋白疗法。此外，现有的抗病毒疗法在短时间内导致病毒抗性，或者在治疗期间无效(McGregor A.et al.,Expert Opin.Drug Metab.Toxicol.2011；7(10):1245-1265)。虽然已长时间研究巨细胞病毒感染，特别是先天性感染的预防，但是市场上没有得到许可的疫苗。美国医学研究所已确定预防性HCMV疫苗的开发为高优先级的目标(www.cdc.gov/cmv/overview.html,October 2011)。在先天性感染的婴儿中，关于子宫内传播，估计来自疫苗诱导的免疫的潜在益处为40倍，而关于中枢神经系统损伤的减少，估计为25-30倍(Britt W.J.et al.,Trends Microbiol.1996；4:34-38)。已努力超过30年开发疫苗。但是，到目前为止没有即将颁发的许可证出现，可能是由于丢失或不完整的临床研究数据。减毒活病毒方法或者尝试可溶性蛋白，特别是截短的gpUL55(gB)亚基疫苗与佐剂如MF59组合或不组合均未导致长期免疫应答(Zhang C.et al.,J.Clin.Virol 2006；35:338-41)。正在研究达到更高效力的新方法，包括糖蛋白组合、基于DNA和肽的候选方法、致密体(WO2008/138590)以及基于病毒载体的候选方法如基于金丝雀痘病毒的可复制的Alvac-gpUL555(gB)疫苗(Bernstein D.I.et al.,J.Infect.Dis.2002；185:686-90)。Alvac疫苗(基于金丝雀痘的颗粒)联合减毒活病毒的临床试验的第一数据导致适当的免疫应答，但是长期效果仍在研究。由于它们的形状，病毒样颗粒可以具有于减毒疫苗相似的特性，因此是有希望的疫苗开发的选项，特别是因为一般接受它们作为优秀的疫苗媒介物。到目前为止，对CMV尚未开发病毒样颗粒。基于过去30年中抗HCMV疫苗开发获得的经验，应当满足以下目标：长期诱导中和抗体，诱导体液和细胞应答，特别是细胞毒性的T-细胞应答，以及最小化副作用。

目前开发的候选疫苗的失败或效力有限的原因是多方面的。宿主中保护性免疫的机制尚不明确。这个的主要原因之一是缺少能够验证负责保护的效应物的适当的动物模型。病毒进入包括上皮细胞、内皮细胞、平滑肌细胞、成纤维细胞、神经元和单核细胞/巨噬细胞在内的导致不同病理的不同细胞类型并复制的能力阻碍了确定有效的效应物。由于病毒的复杂性，并且缺少关于感染特定细胞类型所需的蛋白的知识，理想的HCMV疫苗的组成到目前为止尚不确定。