[发明专利]可以在用于氧化的表面的涂层剂、增粘剂或粘合剂中使用的肽

权利要求书

1.确定粘附于氧化的表面的肽，尤其是十二肽的粘附性质的定量方法，其特征在于：

a)将含肽溶液施加到具有氧化的表面的运载体，并使其干燥，

b)通过洗涤，从所述运载体去除未结合的肽，并使所述运载体干燥，

c)用染色溶液对粘附于所述运载体的肽进行染色，洗掉剩余的染色溶液，并使所述运载体干燥，

d)用提取溶液将粘附于运载体的染色的肽从运载体去除，含有染色的肽的上清液经分光光度计测量。

2.权利要求1的定量方法，其特征在于，通过所述肽的简单的非特异性染色，例如使用考马斯染色溶液染色，或者通过导致特异性结合的化学反应，例如与茚三酮的化学反应，进行本发明的方法的步骤c)中的染色。

3.权利要求1-3之一的定量方法，其特征在于：

·在步骤a)中，将2份10μL的肽溶液施加到直径为2.3cm的圆形HDG钢板，所述肽溶液浓度为2mg/mL，溶于1×PBS，pH 7.4，来自Gibco，其中第一个10μL干燥大约15分钟，第二个10μL随后滴到相同的位置，干燥30分钟，接着在来自UVP Laboratory Products的HB-1000杂交炉里，在30℃，存在200mL水的情况下干燥；

·在步骤b)中，将所述板置于用于洗涤的结晶皿(直径19cm)中，所述结晶皿含有1升1×PBS，pH 7.4，并以60rpm在来自B.Braun的Certomat U水平摇床中在室温轻微摇动10分钟，并随后在30℃干燥；

·在步骤c)中，将所述板转移到6孔皿中，并将150μL考马斯染色溶液用移液管吸取到所述板上，所述溶液配方为含有2g考马斯亮蓝R-250、0.5g考马斯亮蓝G-250、50mL甲醇、425mL乙醇、100mL冰醋酸，加入蒸馏水到1000mL，30秒后，将6mL 1×PBS缓冲液，pH 7.4，小心地加在皿的边缘以冲洗掉染色溶液，并两次将所述板移入6mL1×PBS，pH 7.4中以去除剩余的染色溶液，之后将所述板在30℃短暂干燥；

·在步骤d)中，将20μL体积比9/1的DMSO/CH₃COOH提取溶液用移液管吸取到染色斑点上，允许所述提取溶液在室温作用5分钟，随后通过用移液管吹打直到斑点完全从所述板上去除，将液体取出，将上清液转移到反应容器中，之后2μL上清液在来自PeqLab的Nanodrop 1000分光光度计中测量，选择602nm的UV VIS程序，以确定与氧化的表面上的肽的粘附强度相关的颜色强度。

4.肽，尤其是十二肽，在权利要求1-3之一的定量方法的步骤d)的测量中，所述肽的吸收的范围为0.25-1，优选为0.4-1，更优选为0.5-1，特别优选为0.6-1，以及非常特别优选为0.7-1。

5.权利要求4的十二肽，其氨基酸序列对应于表1中所示的序列模式。

6.权利要求4或5的十二肽，其氨基酸序列在十二个位置的至少八个，优选十二个位置的至少十个，对应于表1中所示的序列模式。

7.权利要求4-6之一的十二肽，其是表1中所列肽8和9，或者表2中所列的肽6、7、13和15。

8.核酸，其编码权利要求4-7之一的肽，尤其是对应于在表3中所列的核酸序列的那些核酸。

9.载体，尤其是克隆载体和表达载体，其含有权利要求8的核酸，所述核酸编码肽，尤其是十二肽。

10.用权利要求8的核酸转化的原核或真核细胞，所述核酸编码肽，尤其是十二肽。

11.用于氧化的表面的涂层剂、涂料、表面涂层和增粘剂或粘合剂，其含有权利要求4-7之一的肽。

12.含有完全或部分由权利要求4-7之一的肽组成的化合物的多层复合物或经涂覆的基质，所述化合物作为所述复合物的至少两个相邻层之间或涂层与基质之间的增粘剂。

13.权利要求4-7之一的肽作为涂层剂、涂料、表面涂层的成分，作为用于氧化的表面的以及多层复合物或经涂覆的基质的增粘剂或粘合剂的成分的用途。