[发明专利]抗原特异性辅助性T细胞受体基因

说明书

本发明涉及编码对WT1辅助肽有特异性的CD4⁺辅助性T细胞的TCR‑α链和TCR‑β链基因中的CDR3的多核苷酸，所述WT1辅助肽具有SEQ ID NO:123的氨基酸序列。本发明还涉及由所述多核苷酸编码的肽。本发明还涉及已导入含有所述多核苷酸的TCR基因的CD4⁺T细胞、使用CD4⁺T细胞诱导WT1特异性细胞毒性T‑淋巴细胞(CTL)、癌症的治疗等。

技术领域

本发明涉及癌抗原特异性辅助性T细胞的T细胞受体(TCR)基因中所包含的多核苷酸。具体地说，本发明涉及编码对具有SEQ ID NO: 123所示氨基酸序列的WT1辅助肽有特异性的CD4⁺辅助性T细胞的TCR的各个α链和β链的互补决定区3 (CDR3)的多核苷酸。本发明还涉及由这些多核苷酸编码的多肽。此外，本发明涉及含有这些多核苷酸的TCR基因所导入的CD4⁺ T细胞，使用所述细胞诱导并加强WT1特异性细胞毒性T细胞(WT1特异性CTL)和使用所述细胞治疗癌症等等。

背景技术

WT1基因(维尔姆斯瘤1基因)是一种被鉴定为造成维尔姆斯瘤的的基因的基团，维尔姆斯瘤是儿童期肾癌(非专利文件1和2)。WT1是一种具有锌指结构的转录因子。最初，WT1基因被认为是肿瘤抑制基因。然而，随后的研究(非专利文件3、4、5和6)表明，WT1基因倒不如说在血液肿瘤和实体癌中起癌基因的作用。

已表明，肽特异性细胞毒性T细胞(CTL)通过使用WT1肽体外刺激外周单核细胞而被诱导，而这些CTL损害内源性表达WT1的血液肿瘤和实体癌中的肿瘤细胞和癌细胞。因为CTL识别呈复合体形式(其中WT1肽与MHC I类分子结合)的WT1肽，所以这类WT1肽因MHC I类亚型而不同(专利文件1、非专利文件7、专利文件2、3和4)。

对癌抗原有特异性的辅助性T细胞的存在对有效诱导CTL是重要的(非专利文件8)。辅助性T细胞通过识别抗原呈递细胞上的MHC II类分子和抗原肽的复合体而被诱导和激活。激活的辅助性T细胞产生例如IL-2、IL-4、IL-5、IL-6等细胞因子或干扰素，并有助于B细胞的增殖、分化和成熟。激活的辅助性T细胞还具有促进T细胞的其它亚型(例如Tc细胞)的增殖、分化和成熟的功能。这样一来，由于激活的辅助性T细胞通过促进B细胞和T细胞的增殖和活化而具有激活免疫系统的功能，因此认为通过MHC II类结合抗原肽(辅助肽)提高癌疫苗的作用来提高辅助性T细胞的功能可用于癌症免疫疗法(非专利文件9)。

目前公认的与WT1有关的辅助肽的实例为与HLA-DRB1*04:01分子结合的肽(非专利文件10)；与HLA-DRB1*04:05分子结合的肽、与HLA-DRB1*15:02分子结合的肽(专利文件5)；与HLA-DRB1*04:05分子、HLA-DRB1*15:02分子、HLA-DRB1*15:01分子、HLA-DPB1*09:01分子和HLA-DPB1*05:01分子结合的肽(专利文件6)。

然而，完全不知道识别辅助肽的抗原特异性CD4⁺辅助性T细胞的T细胞受体(TCR)基因的序列。

背景技术的文件

专利文件

专利文件1：WO2003/106682

专利文件2：WO2005/095598

专利文件3：WO2007/097358

专利文件4：PCT/JP2007/074146

专利文件5：WO2005/045027

专利文件6：WO2008/105462

非专利文件

非专利文件1：Daniel A. Haber等, Cell. 1990 Jun 29; 61(7):1257-69。